迷你梯度PCR儀的性能對(duì)于您和您的研究具有至關(guān)重要的作用,。溫度、變溫速率和保持時(shí)間是影響PCR反應(yīng)成功的關(guān)鍵參數(shù),。高性能PCR儀必須能夠準(zhǔn)確控制液體(反應(yīng))溫度和保持時(shí)間,，不受反應(yīng)體積的影響,。PCR儀對(duì)溫度和保持時(shí)間的控制在PCR優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中具有更重要的作用。PCR儀必須在正常PCR和PCR優(yōu)化運(yùn)行過(guò)程中提供相同的性能,。梯度溫度控制是幫助用戶進(jìn)行PCR優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的特性之一,，以便確定PCR實(shí)驗(yàn)方案的溫度和保持時(shí)間，盡量減少實(shí)驗(yàn)次數(shù),。在理論上,，真正的梯度應(yīng)在均勻的金屬加熱模塊上顯示線性溫度斜率。
迷你梯度PCR儀實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：
1.戴一次性手套,，若不小心濺上反應(yīng)液,，立即更換手套；
2.使用一次性吸頭,，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,，吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染,；
3.避免反應(yīng)液飛濺,，打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,，開蓋前稍離心收集液體于管底,。若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面,；
4.操作多份樣品時(shí),，制備反應(yīng)混合液，先將dNTP,、緩沖液,、引物和酶混合好，然后分裝,，這樣即可以減少操作,，避免污染，又可以增加反應(yīng)的準(zhǔn)確度,；
5.加入反應(yīng)模板,，加入后蓋緊反應(yīng)管；
6.操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照,，即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,，又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性；
7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,，由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,，建議使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特殊的加樣器,，至少PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專用,，不能交叉使用,，尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū)；
8.重復(fù)實(shí)驗(yàn),，驗(yàn)證結(jié)果,，慎下結(jié)論。
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