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產(chǎn)品簡介

磷酸化蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白,，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究,。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

操作方法:
1,、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑,、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻,，放置在冰上備用,；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊,，這個過程注意冰上操作,；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min,；
吸取上清至新的管中,；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC,，即用即取,，避免反復凍融，避免長時間儲存,。)
2,、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；
貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基,，用冷的PBS洗兩次,，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液,；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,，
將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞,，同樣按細胞數(shù)加入裂解液,，
渦旋10s，放置冰上裂解10min,，重復3-4次,；
裂解完畢之后，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min,；
將上清移入新的EP管中,；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC,，即用即取,，避免反復凍融，避免長時間儲存,。)

注意事項：
實驗過程,，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境,；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加,，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑,、實驗耗材,、自產(chǎn)分子生物學產(chǎn)品為一體,，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,，以產(chǎn)品為保障,、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長,。公司織結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)部管理科學,，擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍,，保持了各個部門之間的高效合作運轉(zhuǎn)，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位,。公司注重與*合作,，目前已與Amersham、Amresco,、Axygen,、BD、Corning,、Dragon,、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國各地設(shè)有分銷機構(gòu),。我們將以高度的責任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案,。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì),、充足的庫存,、準確的交貨時間、競爭力的價格,，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù),！立足北京，上海,，*,，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司,。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神，為中國生命科學研究的發(fā)展作出更多的貢獻,。為了更好,、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售,、研發(fā)人員,，歡迎垂詢并期待您的加入！

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