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測定意義：血鈣幾乎全部存在于血漿中，所以血鈣要指血漿鈣,。血漿鈣有離子鈣和結(jié)合鈣兩種形式,，其中只有離子鈣直接起生理作用,，它與結(jié)合鈣處于動態(tài)平衡,，并受血液PH 的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關(guān),，過高或過低都會影響正常生理功能,。本試劑盒用于檢測血液中游離鈣濃度。
測定原理：在強堿溶液中游離鈣與GBHA 反應生成紅色鈣-GBHA 復合物在520 nm 有吸收峰,；通過測定520 nm 吸光度計算游離鈣濃度,。
自備儀器和用品：可見分光光度計、可調(diào)式移液槍,、1mL 玻璃比色皿,、無水甲醇、丙酮和蒸餾水,。
試劑組成和配置：
試劑一液體×1 瓶4℃保存,。
試劑二液體×1 瓶4℃保存。
試劑三液體×1 瓶（空瓶,，試劑自備）,。取 30 mL 試劑瓶，依次加入27 mL 無水甲醇和3 mL丙酮,，蓋緊混勻即可,。
標準液液體×1 瓶3μmol/L, 4℃保存。
血鈣濃度測定操作：
1.分光光度計預熱30 min 以上調(diào)節(jié)波長到520 nm蒸餾水調(diào)零,。
2.空白管： 1mL 玻璃比色皿依次加入蒸餾水50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL,，混勻；最后加入試劑三 400μL,，混勻,；靜置5min 后于520 nm 測定吸光度A空白管。做一個空白管即可,。
3.標準管： 1mL 玻璃比色皿依次加入標準液50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL,，混勻；最后加入試劑三 400μL,，混勻,；靜置5min 后于520 nm 測定吸光度A空白管。做一個空白管即可,。
4.測定管： 1mL 玻璃比色皿依次加入血液樣品50μL試劑一200 μL混勻后再加入試劑二 200μL,，混勻；最后加入試劑三 400μL,，混勻,；靜置5min 后于520 nm 測定吸光度A空白管。做一個空白管即可。
注意：加試劑三后應該在30 min 內(nèi)完成該管的測定,。
血鈣濃度計算：
血鈣含量(μ mol /dL 血液)= [C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×V 樣品總=300×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)
C 標準液：3μmol/mL,； V 樣總樣品總體積，1dL=100 mL,。
注意事項：宜早晨空腹采血并且采血后應該盡快完成測定,。