pET32-TEV原核蛋白表達(dá)試劑盒
目 錄 號(hào) 包裝 價(jià)格
SP1020 10T 2980.00組分與保存條件:
組 分 名 稱 數(shù)量 保存
pET32-TEV vector (500 μg/μl) 10μl -20℃
rTEV Protease (10 U/μl) 100μl -70℃
20XrTEV Buffer 1ml -20℃
0.1M DTT 0.5ml -20℃
Positive Expression Control
Plasmid (10 ng/μl) 5μl -20℃
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:本試劑盒所包含的原核表達(dá)載體(pET32-TEV)是在
pET32載體基礎(chǔ)上改造而成,,該載體增加了TEV蛋白酶(31 KDa)切
位點(diǎn),便于高效率,、高特異性的去除融合Trx.tag,該表達(dá)載體保留
了pET32載體啟動(dòng)所需的所有元件,。本試劑盒配備了rTEV蛋白酶,。
rTEV蛋白酶與EK、Thrombin,、Factor Xa,、SUMO等蛋白酶相比,
具有高活性,、高特異性的雙重特點(diǎn),,rTEV蛋白酶因具有高剪切活性
和特異性,已成為融合蛋白表達(dá)后去除融合tag的*蛋白酶,。本
rTEV蛋白酶包含6×His tag,,在酶切消化完畢后可同tag和未*酶
切的融合蛋白一起通過(guò)結(jié)合Ni-NTA而去除,去除掉tag的目的蛋白
因不與Ni-NTA純化柱(Cat.No.: SP1020, Solarbio)結(jié)合而流出,,從而
得到高純度不含融合tag的目的蛋白。pET32-TEV載體保留了Trx標(biāo)
簽(分子量約17 KDa),,該標(biāo)簽可有效的提高蛋白表達(dá)的可溶性,,從
而簡(jiǎn)化后續(xù)的純化步驟、提高活性蛋白的表達(dá)量,。
Positive Expression Control Plasmid已在pET32-TEV載體中插入525
bp基因(Kpn I/Xho I),,該蛋白融合表達(dá)后分子量約37 KDa,,該融合蛋
白在rTEV酶切后,目標(biāo)蛋白分子量約20 KDa,、Trx.tag約17 KDa,。