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ELISA標(biāo)本收集

閱讀:2552      發(fā)布時(shí)間:2012-6-4
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 ELISA標(biāo)本收集

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是
否足夠穩(wěn)定,。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),,對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)
本,,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下
保存,。因冰室與室溫存在一定溫差,,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)
質(zhì)量,,所以避免反復(fù)凍融,。代測(cè)標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人
員索要說(shuō)明書,,具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通,。
ELISA標(biāo)本一般包括血清、血漿,、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織標(biāo)
本,、胸腹水,、腦脊液等。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)
/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合
10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
尿液:
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集
上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參
照此實(shí)行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),, 用無(wú)菌管收集,。離心2 0 分鐘左右
(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用
PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。
通過(guò)反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形
成,應(yīng)再次離心,。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速
冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的
PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),其
余冷凍備用,。
腦脊液標(biāo)本:
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變
性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解
含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分
裝三個(gè)無(wú)菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢
查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)
本采集較難,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全,。
胸腹水標(biāo)本:
與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,及時(shí)送檢,。一般也分
裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,一管生化檢查,,一管細(xì)菌培養(yǎng),,
順序以與腦脊液相同為宜

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