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ELISA標(biāo)本收集

閱讀:2357      發(fā)布時(shí)間:2012-6-4
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 ELISA標(biāo)本收集

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,,必須清楚要檢測(cè)的成份是
否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),,對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測(cè)的標(biāo)本,,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)
本,,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮?,將?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下
保存。因冰室與室溫存在一定溫差,,蛋白極易降解,,直接影響實(shí)驗(yàn)
質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融,。代測(cè)標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人
員索要說明書,,具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。
ELISA標(biāo)本一般包括血清,、血漿,、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織標(biāo)
本,、胸腹水、腦脊液等,。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)
/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合
10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
尿液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集
上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參
照此實(shí)行,。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí), 用無菌管收集,。離心2 0 分鐘左右
(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用
PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。
通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形
成,,應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速
冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的
PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),,其
余冷凍備用,。
腦脊液標(biāo)本:
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變
性,,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn);有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解
含量減少,;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分
裝三個(gè)無菌管,*管作細(xì)菌培養(yǎng),,第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢
查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒,。因標(biāo)
本采集較難,,全部送檢和檢測(cè)過程應(yīng)注意安全。
胸腹水標(biāo)本:
與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,,及時(shí)送檢。一般也分
裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),,
順序以與腦脊液相同為宜,。

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