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Hamilton 離子排斥色譜柱在使用前要進(jìn)行活化操作
離子色譜柱是離子色譜系統(tǒng)的心臟,，只有性能優(yōu)良的色譜柱才能達(dá)到良好的分離效果,，這對(duì)色譜柱材料，填充料(交換樹脂),、柱尺寸,、裝柱技術(shù)等均有一定的要求。柱兩端均有微孔篩板以防試料或洗脫液中的細(xì)微顆粒進(jìn)入柱中，影響柱中樹脂的滲透性,。
Hamilton 離子排斥色譜柱的活化操作,，以常見(jiàn)的C18反相分析柱為例，出廠時(shí)一般都封裝有甲醇或乙腈等有機(jī)溶劑,。隨著時(shí)間的推移,，色譜柱內(nèi)的有機(jī)溶劑緩慢揮發(fā)，色譜柱內(nèi)可能出現(xiàn)氣泡,。因此,，新購(gòu)買的色譜柱在使用前一般都要進(jìn)行活化操作。
下面以常見(jiàn)的4.6mmX150mm,5μm粒徑的C18反相分析柱為例：
1.在活化色譜柱前,，應(yīng)先用相關(guān)試劑沖洗液相系統(tǒng)的流路,，確保無(wú)污染物殘留。切換至封柱試劑(一般為甲醇或乙腈),，置換流路內(nèi)的試劑,。
2.停泵，將分析柱的進(jìn)液口連上系統(tǒng),，移除出液口的堵頭,，出液口不連上系統(tǒng)。傾斜放置色譜柱,，使其出液口高于入液口,。
3.以0.1ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱約5分鐘，切換至0.2ml/min的流速繼續(xù)沖洗,。觀察色譜柱出液口,，若連續(xù)出液，停泵,，將色譜柱出液口接入液相系統(tǒng),。
4.以0.1ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱，5分鐘內(nèi)將流速平穩(wěn)提升至0.5ml/min繼續(xù)沖洗色譜柱,。
5.以0.5ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱,，期間觀察壓力與基線是否平穩(wěn)，直到?jīng)_洗的總流量達(dá)到30個(gè)柱體積,。
6.活化完成：對(duì)于久置不用的類似型號(hào)色譜柱,，再次使用前也可參考上述步驟進(jìn)行活化。