科研用途,，不屬于醫(yī)療器械

人瘦素超敏科研試劑盒-脂代謝（日本IBL）

背景簡介

1950年發(fā)現(xiàn)隱性肥胖基因突變導(dǎo)致肥胖，且與二型糖尿病綜合征的病態(tài)肥胖類似,。1994年在洛克菲勒大學(xué)團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)肥胖基因編碼形成瘦素,。瘦素是由肥胖基因產(chǎn)生的16KDa的分泌型蛋白。脂肪組織產(chǎn)生瘦素并釋放至血液中,，隨著脂肪的累積,，血液中瘦素的水平含量也呈增長趨勢。瘦素作為lipostat,，隨著脂肪組織內(nèi)脂肪的沉積而增加,；它還可作為一激素，指令大腦終止食物的消化和增加活動(dòng),；還證明了可用于標(biāo)記和控制青春期的開始,；另外，近期研究表明,，瘦素可通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制骨形成,。

實(shí)驗(yàn)原理

此試劑盒是一種夾心法的ELISA試劑盒，使用了兩種高特異性的抗體,。TMB作為顯色劑,，zui終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中瘦素的量成正比

檢測范圍

15.63~1000pg/mL

預(yù)期用途

此試劑盒用于人血清，EDTA-血漿和細(xì)胞上清中瘦素的定量檢測

重組的和天然的瘦素都可用此試劑盒檢測

人瘦素超敏科研試劑盒-脂代謝 組成明細(xì)

1. 微孔板,，96T,，包被有抗人瘦素兔子IgG抗體，親和純化

2. 標(biāo)記抗體濃縮,，30X,，0.4ml，HRP標(biāo)記的抗人瘦素兔IgG Fab片段

3. 標(biāo)準(zhǔn)品,，0.5ml,，2支，重組人瘦素

4. EIA緩沖液,，30ml,，1%的BSA，含0.05%的吐溫20的PBS

5. 標(biāo)記抗體稀釋液,，12ml,，1%的BSA,，含0.05%的吐溫20的PBS

6. 著色劑，TMB,，15ml

7. 終止液，1N硫酸,，12ml

8. 洗滌緩沖濃縮液,，40X，50ml,，0.005%吐溫20的磷酸緩沖液

準(zhǔn)備步驟

試驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供

• 酶標(biāo)儀（450nm）

• 帶刻度的量筒與燒杯

• 孵箱（37℃±1℃）

• 吸水紙

• 稀釋試管

• 微量移液器和取樣吸頭

• 去離子水

• 坐標(biāo)紙（log/log）

• 用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的試管

• 洗滌瓶

人瘦素超敏酶免試劑盒（日本IBL）特別注意

1. 試驗(yàn)樣品采集后應(yīng)立即檢測或是凍存,，凍存的樣品避免反復(fù)凍融，檢測前應(yīng)在低溫下先將其*溶解混勻

2. 試驗(yàn)樣品用EIA緩沖液稀釋

3. 試驗(yàn)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)做雙份檢測

4. 試驗(yàn)樣品應(yīng)在中性PH范圍,，有機(jī)溶劑的污染可能會(huì)影響檢測

5. 只能用試劑盒提供的洗滌液洗板,，否則會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)失敗

6. 吸水紙上拍干微孔板，不能擦拭

7. TMB底物液應(yīng)貯存于黑暗處,，因其對光敏感,，且避免接觸金屬

8. 加入終止液后30min內(nèi)必須酶標(biāo)儀讀數(shù)

結(jié)果計(jì)算

繪制曲線前，所有的數(shù)據(jù)都應(yīng)減去試驗(yàn)樣品空白值,，包括標(biāo)準(zhǔn)品和未知的樣品,。以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值和濃度在對數(shù)-對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可直接讀取未知樣品的濃度

附：采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測,，只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),，如坐標(biāo)參數(shù)（線性，半對數(shù)）和計(jì)算方式參數(shù)（三次回歸,、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程）,，即可直接得到結(jié)果