多巴胺試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測(cè),，可手動(dòng)操作,，也可自動(dòng)操作,。進(jìn)一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。 兒茶酚胺類(lèi)激素腎上x(chóng)ian素,、去甲腎上x(chóng)ian素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì),、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織,，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過(guò)程的調(diào)節(jié),。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上x(chóng)ian素和去甲變腎上x(chóng)ian素的分泌量都會(huì)增加,，因而這些激素可用于疾病的診斷,。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義,。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷,，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。
因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開(kāi)始時(shí)有提取步驟,，所以用戶可使用所有動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。此試劑盒可檢測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物,，所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同,。
多巴胺試劑盒檢測(cè)原理
多巴胺試劑盒利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體,。在溫育時(shí)間之內(nèi),，加入的抗體可直接與抗原分子上的一個(gè)表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗（可與抗原分子上的不同表位結(jié)合）在包被孔中溫育,。加入底物液后,，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定,。
貯存與穩(wěn)定性
多巴胺試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃,，避免熱源或太陽(yáng)直射,。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開(kāi)封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下,。
實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）
1、移液器（10,；10-100,；100-1000μL）
2、軌道搖床（200-900rpm）
3,、旋渦混合器
4,、帶儲(chǔ)器的8通道移液器
5、洗滌瓶,，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)
6,、酶標(biāo)儀，405nm(參考波長(zhǎng)：620-650 nm)
7,、雙蒸水或去離子水
8,、吸水紙，取樣吸頭,，計(jì)時(shí)器
9,、樣品稀釋用試管
多巴胺試劑盒檢測(cè)步驟
1、在一次性試管內(nèi),，用釋放緩沖液以1:51的比例稀釋提取的標(biāo)準(zhǔn)品,，質(zhì)控品和尿液樣本（如：10ul提取樣本+500ul的釋放緩沖液）
2、在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液,，輕輕振蕩,。
3、將預(yù)稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,，質(zhì)控品和尿液樣本加100ul至相應(yīng)孔內(nèi)血漿樣本直接加100ul于相應(yīng)孔內(nèi)在此步驟中,，將槍頭直接觸碰COMT酶溶液，顏色會(huì)轉(zhuǎn)為粉紅色,，輕輕混勻,。
4、每孔中加入50μL多巴胺抗血清,。
5,、蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min
6,、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。
7,、每孔加入100μL酶聯(lián)物
8,、蓋板,。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min
9、棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次,。
10、加底物液和終止液時(shí),，其時(shí)間間隔應(yīng)相同
11,、每孔加入200μL底物液
12、在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min,。如果自動(dòng)操作時(shí)的溫度超過(guò)25℃時(shí),，則應(yīng)相應(yīng)的將溫育時(shí)間縮短至30min。
13,、每孔加入50μL PNPP終止液以終止底物反應(yīng),，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。
14,、加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：620-650nm）
