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免疫化學(xué)發(fā)光法(雙抗體夾心法)測(cè)定IgE
[檢測(cè)方法] 免疫化學(xué)發(fā)光法(雙抗體夾心法)。
[方法學(xué)原理] 加入與磁性顆粒共價(jià)結(jié)合的鼠抗人IgE抗體,、待測(cè)標(biāo)本以及吖啶酯標(biāo)記的羊抗人IgE抗體(1gElite試劑),,經(jīng)過(guò)溫育形成固相包被抗體—抗原(1gE)—吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物,,經(jīng)洗滌后,加人氧化劑(H2O2)發(fā)光,,其光量子數(shù)與IgE濃度呈良好的線(xiàn)性相關(guān),。通過(guò)光量子數(shù)與IgE濃度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣本產(chǎn)生的光量子數(shù)可得出IgE含量,。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈血2ml,,不抗凝。
[試劑]
1.免疫化學(xué)發(fā)光法配套試劑及定標(biāo)液
2.質(zhì)控物(高,、中,、低)
[儀器] ACSl80免疫發(fā)光儀。
[檢測(cè)步驟]
1.將血清編號(hào)后加入反應(yīng)管內(nèi),,插入樣品盤(pán),;
2.將試劑放入試劑盤(pán);
3.將編號(hào)及樣品盤(pán)號(hào)對(duì)應(yīng)輸入電腦,,并選擇檢測(cè)項(xiàng)目IgE,,保存;
4.按START鍵運(yùn)行,。
5.ACSl80儀將30/Il樣本液裝入反應(yīng)杯中,;將100u1 IgE lite試劑與450ul總IgE固相試劑加入,并于
[正常參考值] 0—378U/m1
[注意事項(xiàng)]
1.試劑取出應(yīng)充分混勻。
2.樣本應(yīng)充分凝固,,無(wú)纖維,、氣泡及其他物質(zhì),。
3.樣本檢測(cè)應(yīng)在8h內(nèi)完成,否則應(yīng)置2~
4.48h內(nèi)不檢測(cè),,應(yīng)將樣本于一
5.若試劑室溫放置超過(guò)40h應(yīng)棄之不用,不使用任何過(guò)期試劑,。
[臨床意義] IgE升高,,主要見(jiàn)于過(guò)敏性疾病。在感染性疾病中,,如寄生蟲(chóng)感染,、支氣管—肺曲霉菌病也可升高。
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