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速率散射比濁法檢測補(bǔ)體C3,、C4
補(bǔ)體(complement,,C)是由近20種不同血清蛋白組成的多分子系統(tǒng),,約占血清球蛋白總量的10%,。補(bǔ)體在血清中的含量相對穩(wěn)定,不因免疫應(yīng)答而增加,,僅在某些病理情況下才會發(fā)生波動,。補(bǔ)體系統(tǒng)的基本組成包括9種血清蛋白成分,按發(fā)現(xiàn)的先后順序而分別命名為C1-9,。補(bǔ)體是一個復(fù)雜的反應(yīng)系統(tǒng),,除了溶解細(xì)胞和協(xié)助殺菌作用外,還可促進(jìn)炎癥反應(yīng),,與其他生物活性系統(tǒng)有相互促進(jìn)、相互制約的關(guān)系,,這些關(guān)系的紊亂是導(dǎo)致許多疾病損傷的物質(zhì)基礎(chǔ),。C3是一種β球蛋白,是補(bǔ)體中含量zui多,、作用zui重要的一個組分,,是補(bǔ)體兩條主要激活途徑的中心環(huán)節(jié),有重要的生物活性作用,,可在肝臟中產(chǎn)生,。C4是由肝臟、巨噬細(xì)胞合成的,,參與經(jīng)典激活途徑,,是補(bǔ)體中含量僅低于C3的重要組分。常用檢測方法為速率透射比濁法,、速率散射比濁法等,。
[檢測方法] 速率散射比濁法
[方法學(xué)原理] 抗原(C3、C4)與抗體(抗C3,、抗C4)在液相中可快速反應(yīng),,形成的免疫復(fù)合物顆粒具有特殊的光學(xué)特性,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度,。速率是指單位時間內(nèi)抗原,、抗體形成免疫復(fù)合物的速度。隨著時間的延長免疫復(fù)合物總量是逐漸增加的,,而速率變化為慢+快一慢,,其反應(yīng)速率zui快的某一時間稱為速率峰。當(dāng)反應(yīng)體系中的抗體量過剩時,,速率峰的高低只與C3,、C4含量成正比,儀器將測得的速率峰值通過對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的C3,、C4濃度,。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 空腹靜脈血2ml,,不抗凝。
[試劑] 免疫比濁儀配套C3,、C4試劑盒,,內(nèi)含有稀釋液、緩沖液,、抗血清等,,按說明書配制。
[儀器] 全自動特種蛋白分析儀,。
[檢測步驟]
1.標(biāo)本處理,,3 500rpm離心lOmin,分離血清,。
2.根據(jù)操作程序進(jìn)行樣品測定:
(1)輸入杯號,;
(2)選擇所測項目C3、C4,;
(3)存盤,;
(4)編程完畢后,將標(biāo)本放人標(biāo)本杯中,,且放入標(biāo)本盤中相應(yīng)位置,,將所做項目的試劑放人試劑盤中相應(yīng)位置,確認(rèn)無誤后,,開始運(yùn)行特種蛋白分析儀,。
[正常參考值] C3:0.8~1.
[注意事項]
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)置室溫環(huán)境中平衡,。
2.試劑瓶蓋打開時應(yīng)注意打破瓶口的液膜,,以防液感儀感應(yīng)錯誤。
3.血清中若含有脂類應(yīng)高速離心分離脂質(zhì),,防止假濁度產(chǎn)生,。
[臨床意義] 在感染性疾病中,急性感染期可見C3,、C4增高,。由于補(bǔ)體在肝細(xì)胞中合成,所以重癥病毒性肝炎,、慢性病毒性肝炎,,特別是轉(zhuǎn)化為肝硬化后,C3,、C4水平均下降,。
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