采用ELISA來定量測定結合的噬菌體

 [器材和試劑]

●  洗滌緩沖液

●  結合緩沖液

●  辣根過氧化物酶（HRP）連接的抗M13單克隆抗體（mAb）  （Amersham Biosciences）   

●  HRP底物㈠OPD（鄰苯二胺，o-phe-nylenediamine）  （Sigma）或ATBS  【2，2-連氮基-雙-（3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸）,，2,，2’-azinobis（3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid）】  （Kinkegaard和Perry）

●  預先準備的噬菌體包被的微孔板

[方法]

1,，每塊板用洗滌緩沖液洗滌3次,。

2．用結合緩沖液將HRP聯(lián)結的抗M13單克隆抗體做1：5000稀釋,，每孔加入100ul,，室  溫下孵育30分鐘。

3．每塊板用洗滌緩沖液洗滌3次,。

4．每孔加入lOOglOPD顯色,，不超過15分鐘后用50ul 2．5mol/L的HzS04終止反應。5．檢測每塊板在492nm處的吸光度,。

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