白介素4（IL-4）的誘生

    IL-4主要是TH細(xì)胞經(jīng)抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生,，可調(diào)節(jié)B細(xì)胞及其他多種免疫細(xì)胞的功能。制備IL-4多取用正常組織細(xì)胞（如人脾臟,、扁桃體、淋巴結(jié)）,、外周血和大鼠或小鼠脾臟細(xì)胞等，傳代細(xì)胞（如小鼠胸腺瘤細(xì)胞系EL-4細(xì)胞,、L1／1細(xì)胞,、MBI-1T細(xì)胞系）和一些T細(xì)胞雜交瘤，經(jīng)抗原或非特異性激活劑刺激后獲得,。

    IL-4的誘生可用如下途徑

    1．EL-4細(xì)胞經(jīng)TPA或與ConA協(xié)同刺激時(shí),，可產(chǎn)生價(jià)IL-2和IL-4。

    2．L1／I細(xì)胞用特異性抗原或針對(duì)CD3分子的抗體刺激后,，可產(chǎn)生IL-3,、IL-4、IL-5,、IL-6,，而不產(chǎn)生IL-2、IFN-r,。

    3．用ConA誘導(dǎo)Swiss小鼠或其他品系小鼠脾細(xì)胞制備IL-4,。

    4．外周血淋巴細(xì)胞（peripheralbloodlymphocyte，PBL）培養(yǎng)上清,。

    （1）取肝素抗凝血10mL,，用生理鹽水稀釋1倍，置淋巴細(xì)胞分層液上面,，離心制備淋巴細(xì)胞懸液,。

    （2）調(diào)整細(xì)胞濃度為1X 106／mL，同時(shí)加入PHA 100／le／mL或TPA 1ng／mL和A23187（鈣離子載體）0．1ug／mL,，培養(yǎng)液為8％NBS-IMDM或1％人AB血清-IMDM,，37℃，5％C02溫箱中培養(yǎng)24h,。

    （3）離心,，分離上清、濾過,、分裝,、—20~C保存。

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