葡萄球菌A蛋白（SPA）的性質(zhì)

    葡萄球菌A蛋白（staphylococalproteinA,，SPA）是一種從金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁分離的蛋白質(zhì),。早在1940年Vevwey就發(fā)現(xiàn)在某些金黃色葡萄球菌菌株含有一種物質(zhì),，在雙向擴(kuò)散試驗(yàn)中能與正常人血清出現(xiàn)沉積現(xiàn)象,，Jensen（1959）也發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象,，并將其命名為A抗原,。直到1963年,，Lofkvist等分離了該抗原，并證明它是一種蛋白質(zhì),。為與A多糖相區(qū)別,，Grov（1960）將其命名為葡萄球菌A蛋白，簡稱SPA或A蛋白,。由于SPA能與人及多種哺乳類動(dòng)物血清中的IgG呈非特異性結(jié)合,，并保持其原有的活性，引起了廣大免疫學(xué)者的興趣，并發(fā)展成為免疫學(xué)上一種極為有用的工具,，使SPA分子在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中得到廣泛的應(yīng)用,。

    （一）SPA的主要存在部位

SPA存在于大多數(shù)（90％）金黃色葡萄球菌中，而不存在于表皮葡萄球菌中,；并且主要存在于血漿凝固酶陽性菌株,，而不存在于陰性菌株中。前者是致病的,，后者是非致病的,，但在體內(nèi)研究中尚未發(fā)現(xiàn)SPA和菌株致病性之間有任何肯定的關(guān)系。不同菌株間的SPA含量有明顯差異,，以I株金黃色葡萄球菌含SPA量zui高,，和細(xì)胞壁的肽聚糖呈共價(jià)結(jié)合?？苟籽趸角嗝顾赝蛔冎?/span>（methicillin-resistant strain）能產(chǎn)生分泌SPA,，它較之細(xì)胞壁所含的SPA在免疫學(xué)性質(zhì)上相似，但易分離,，損失少,。

    （二）SPA的相對分子質(zhì)量及等電點(diǎn)

SPA為蛋白質(zhì)成分，僅含少量或不含碳水化合物,，其相對分子質(zhì)量因提取方法不同而異,，用脫氧核糖核酸酶消化細(xì)胞壁后超速離心或用加熱抽提法，所測相對分子質(zhì)量為12000～15000,。用沉淀平衡分析和在6mol／L鳥嘌呤鹽酸中凝膠過濾，測出相對分子質(zhì)量為42000,。SPA為單鏈多肽,，內(nèi)含3個(gè)高度相似的Fc段結(jié)合區(qū)，每區(qū)由50個(gè)以上的氨基酸組成,，不含色氨酸和半胱氨酸,。其羧基末端是賴氨酸，氨基末端結(jié)構(gòu)尚未肯定,。SPA黏度高于球蛋白,，等電點(diǎn)（pi）為5．1，其天然結(jié)構(gòu)十分穩(wěn)定,，在應(yīng)用6 mol／L鳥嘌呤鹽酸變性劑的條件下,，尚能保存某些三級(jí)結(jié)構(gòu)，如將變性劑除去,，則能自然矯正而恢復(fù)原有結(jié)構(gòu),。

    （三）SPA的免疫學(xué)特性

    SPA之所以引起免疫學(xué)家的重視，是因?yàn)樗哂械拿庖邔W(xué)特性。SPA具有和人及許多動(dòng)物（如豚鼠,、豬,、小鼠、猴等）IgG結(jié)合的能力,。SPA結(jié)合部位是Fc段而不是Fab段,，這種結(jié)合不會(huì)影響抗體的活性。SPA具有的結(jié)合力是雙價(jià)的,，每個(gè)SPA分子可以同時(shí)結(jié)合2個(gè)IgG分子,，也可一方面同IgG相結(jié)合，一方面與標(biāo)記物[如熒光素,、酶（HRP,、AKP和GO等）、膠體金和鐵蛋白等]相結(jié)合,。還有一個(gè)饒有興趣的事實(shí)是,，與SPA結(jié)合后IgG可用4mol／L鳥嘌呤鹽酸等使之解離。利用這一生物化學(xué)特性,，可以將SPA交聯(lián)在葡聚糖凝膠上,，對抗原或抗體蛋白質(zhì)進(jìn)行純化。SPA對IgG免疫球蛋白亞型的結(jié)合有選擇性,，如SPA與人IgG亞型IgGl,、IgGz和IgG4有結(jié)合力，不結(jié)合IgG3,；只結(jié)合IgH2,，而不結(jié)合IgHl。SPA與人及大部分哺乳動(dòng)物血清中的IgG結(jié)合,，能反應(yīng)的動(dòng)物包括豚鼠,、小鼠（純種）、狗,、豬,、猴和經(jīng)免疫的家兔等。其結(jié)合部位為免疫球蛋白的CH2和Cn3的交界處,。另外,，它還能與少數(shù)血清中的IgM結(jié)合。SPA還能激活和固定補(bǔ)體,，激活B淋巴細(xì)胞,，促使其成熟并分泌產(chǎn)生各類免疫球蛋白。

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