可能影響酶免疫測定結(jié)果的標本外源性干擾因素

    外源性干擾因素包括標本溶血,、標本被細菌污染,、標本貯存時間過長和標本凝固不全等,。

    1．標本溶血  要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團,，其有類似過氧化物的活性,，因此,，在以HRP為標記酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高,，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,，從而與后面加入的HRP底物反應顯色,。

    2．標本被細菌污染  樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長,，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用,；二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的p—半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。

    3．標本貯存時間過長  標本在2～8~C下保存時間過長,，IgG可聚合成多聚體,，在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至造成假陽性,。血清標本如是以無菌操作分離,，則可以在2～8~C下保存1周，如為有菌操作,，則建議冷凍保存,。樣本的長時間保存，應在一70~C以下,。

    4．標本凝固不全  血液采集后,，如收集管中無促凝劑和抗凝劑，則血液通常在半小時后開始凝固,，18～24h*凝固,。日常檢驗中，常在血液還未開始凝固時即離心分離血清,，此時因血液沒有*凝固,，離出的“血清”并非為*的血清，其中仍殘留部分纖維蛋白原,，如將其加入微孔中,，在ELISA測定過程中仍可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果,。因此,，血液標本采集后，應使其充分凝固后再分離血清,，或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當?shù)拇倌齽?/span>

    5．冷凍保存標本避免反復凍融  冷凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融,。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果,。此外,，凍融標本的混勻亦應注意,，不要進行劇烈振蕩,，反復顛倒混勻即可。此外,，標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的渾濁或絮狀物時,，應離心沉淀后取上清檢測,。

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