操作步驟

可能原因

解決辦法

選

擇

試

劑

選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。

加

樣

1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣,；
2.手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）,；
3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外,。

1.標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘,；若在幾天內(nèi)檢測(cè),，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi),。
2.加樣后及時(shí)放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
4.如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標(biāo)本較多時(shí),，請(qǐng)分批操作,。

孵 育

1.孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),，吸附于孔壁,，難于清洗*；
2.孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,，難以清洗*。

1.貼封片或加蓋,；
2.按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,。

洗 板

1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2.采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),，洗液量不足,，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞,，抽吸不*,；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差,。
3.反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng),。

1.保證洗液注滿各孔，洗板針暢通,，洗完板后在吸水紙（選擇干凈,、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2.合理安排,，或多用幾臺(tái)洗板機(jī),。

顯 色

1. 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑,；
2. 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。

1. 顯色劑盡量在臨用前配制,，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用；
2. 加樣時(shí)保持顯色劑不外流,；
3.A,、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。

終 止

加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加,。

加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

全

過(guò)

程

1.整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;
2.實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,，有效提高檢測(cè)質(zhì)量,。