離心是在離心力的作用下,,利用被離心樣品物質(zhì)的沉降系數(shù)、浮力,、密度的差別,,進(jìn)行分離、濃縮,、提取制備樣品以及分析測(cè)定生物大分子分子量和純度,。按其工作方式可分為離心過濾、離心沉降(或澄清)及離心分離,。
離心機(jī)的設(shè)計(jì)原理是利用驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)時(shí)所產(chǎn)生的離心場(chǎng)力加快樣品粒子的沉降速度,,把樣品中不同沉降系數(shù)或浮力密度差的物質(zhì)分離開。決定離心力大小的因素除轉(zhuǎn)速(Revolved per minute,,r/min)和離心(轉(zhuǎn)頭)半徑外,,還與粒子在旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)中所受到的力(重力、浮力,、摩擦力)之作用影響有關(guān),,離心力方向與重力呈垂直,故常用相對(duì)離心力(Relative centrifugal force,,rcO表示,,即相對(duì)于重力作用在旋轉(zhuǎn)粒子上的離心力,用重力加速度g(980cm/s )作為量值,,也稱為“g-Force",,表達(dá)式為:RCF=o)~/980。
離心技術(shù)的關(guān)鍵是如何根據(jù)樣品粒子和介質(zhì)的性質(zhì)以及轉(zhuǎn)子的技術(shù)參數(shù)來確定離心力,、轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間設(shè)置,。粒子(細(xì)胞、細(xì)胞器及大分子的統(tǒng)稱)的沉降或分離速率取決于離心力,、粒子的大小,、形狀和密度以及沉降介質(zhì)的密度和粘度。 根據(jù)用途,、轉(zhuǎn)速,、功能配置可將醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)幾大類型,不同轉(zhuǎn)速的離心機(jī)產(chǎn)生不同的離心力,,具有不同的用途,。
低速機(jī)型設(shè)計(jì)有較大容量(Large capacity centrifuge,≥12L),,主要用于細(xì)胞,、血清,、血漿以及批量樣品的分離制備,另在生物制藥領(lǐng)域發(fā)揮著較大作用,;
高速離心機(jī)(High speed cen—trifuge)主要用于某些亞細(xì)胞器結(jié)構(gòu),、核酸、蛋白質(zhì),、質(zhì)粒,、細(xì)菌的分離和制備;而超速離心機(jī)(Ultracentrifuge).~0適應(yīng)于病毒,、核酸及蛋白質(zhì)的分離純化,,進(jìn)一步的分析研究還可采用分析型超速離心機(jī)。
近年來,,有一種稱之為“通用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)(Universal lab—oratory centrifuge)"的機(jī)型進(jìn)入醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室,,在性能上順應(yīng)了分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)技術(shù)的需要,,倍受實(shí)驗(yàn)室工作者的關(guān)注,。其特點(diǎn)是兼顧了低速機(jī)和高速機(jī)、微量和較大容量的性能,,但體積小,、重量輕、耗電小,、操作簡(jiǎn)便,;常見機(jī)型zui高轉(zhuǎn)速≥13000r/min,個(gè)別機(jī)型超過20000r/min,,起始轉(zhuǎn)速可低到100r/min,;zui大rcf一般可達(dá)20000~g以上,個(gè)別機(jī)型達(dá)到60000xg,;離心容量zui大可達(dá)3000ml,。
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