一、去除樣品和流動相中的固體顆粒
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,，而且也會引起柱效下降，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導(dǎo)致色譜峰型拖尾,、變寬，從而使柱效下降,。
二,、流動相的pH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
由于填料中存在Si-C和Si-O鍵，流動相超過其pH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降,，使用壽命變短。由于流動相的pH控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害,，通常很難使色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對待，嚴(yán)格控制流動相的pH值,。
三,、使用保護(hù)柱或在線過濾器
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì)，因為泵的磨損,、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升高,、柱效下降,。保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,，因此,，除對樣品和流動相進(jìn)行過濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,。
如果確認(rèn)色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進(jìn)行補救：
1、先在色譜柱前加上保護(hù)柱或在線過濾器,，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min。
2,、先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,，然后反向使用。
四,、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出,，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié)，柱壓上升;同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾，使用后要沖洗,。具體方法如下：
1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出,。
注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。
3,、緩沖鹽析出的補救方法：
1)方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
2)方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
五,、防止強保留物質(zhì)在色譜柱上存留
強保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬,、拖尾,，使柱效下降,，同時也會引起保留時間的變化,，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng),，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來,，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言，很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì),，因此要防止強保留物質(zhì)的累積,，需要在每天的日常維護(hù)清洗色譜柱。
清洗方法：
1,、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽。
2,、使用過緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
17
立即詢價
您提交后,，專屬客服將第一時間為您服務(wù)