一,、方法
1,、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法
陽(yáng)離子脂質(zhì)體表面帶正電荷,，能與核酸的磷酸根通過靜電作用,，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA脂復(fù)合物,，也能被表面帶負(fù)電的細(xì)胞膜吸附,，再通過融合或細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中,，是目前實(shí)驗(yàn)室方便的轉(zhuǎn)染方法之一,，其轉(zhuǎn)染率較高，優(yōu)于磷酸鈣法,。由于脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞有一定的毒性,，所以轉(zhuǎn)染時(shí)間一般不超過24小時(shí)。常用細(xì)胞類型：cos-7 ,、BHK,、NIH3T3 、Hela等,。

2,、電穿孔轉(zhuǎn)染法
電流能夠可逆地?fù)舸┘?xì)胞膜形成瞬時(shí)的水通路或膜上小孔促使DNA分子進(jìn)入胞內(nèi)，這種方法就是電穿孔,。當(dāng)遇到某些脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率很低或幾乎無法轉(zhuǎn)入時(shí)建議用電穿孔法轉(zhuǎn)染,。一般情況下，高電場(chǎng)強(qiáng)度會(huì)殺死50%-70% 的細(xì)胞?，F(xiàn)在針對(duì)細(xì)胞死亡開發(fā)出了一種電轉(zhuǎn)保護(hù)劑,，可以大大的降低細(xì)胞的死亡率,，同時(shí)提高電穿孔轉(zhuǎn)染效率。

3,、病毒感染
對(duì)于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染與電穿孔轉(zhuǎn)染都無法成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系建議用病毒感染,，此法可以快速100%感染，檢測(cè)成功率高,。

二,、常用步驟
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘,，溶解脂狀物,。
② 震蕩后將試劑放在－20攝氏度保存，使用前還需震蕩,。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體  體積：DNA質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞,。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的MyoD或者EGFP的DNA,，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,，再次震蕩。
3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘,。
4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,，用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次。
5. 加入混合液,，將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個(gè)小時(shí),。
6. 到時(shí)后，根據(jù)細(xì)胞種類決定是否移除混合液,，之后加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24－48小時(shí),。