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當(dāng)前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒操作的5個方面
ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應(yīng)留神以下5個方面:
1. 跟著病況的進展或由其他因素影響,,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖,,因此有必要對標(biāo)本進行預(yù)處理,。間接法測定中,,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響,。
2. 加樣一般運用加液器,,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本,、加酶結(jié)合物,、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時有必要每份標(biāo)本運用一支移液器吸嘴,,避免交叉污染,。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴,。
3.在成批手藝檢測中,,還應(yīng)留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,,使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致,,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導(dǎo)致過錯效果或定量不準(zhǔn),。
4. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實驗勝敗的一個關(guān)鍵步驟,。目的是除掉未結(jié)合的免疫反響物,間斷抗原抗體反響,除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分,、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì),。
5. 斷定效果須運用ELISA試劑盒測讀儀,比色法判讀可選擇單波長或雙波長,,根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片,,以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。酶標(biāo)儀具有杰出的重復(fù)性,。
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