收到細(xì)胞株包裹時(shí),，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請(qǐng)立即通知,。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng),， 或立即冷凍保存(置于–70 °C，隔夜后,，移到liq N2),。

冷凍細(xì)胞解凍程序:

1.根據(jù)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)來(lái)配置培養(yǎng)基，不同的細(xì)胞株適應(yīng)的培養(yǎng)基不同,，請(qǐng)務(wù)必按細(xì)胞需求來(lái)配置,。

絕大多數(shù)的細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，所以當(dāng)細(xì)胞換成你們自己的培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)變差或者速度變緩的時(shí)候,，不要著急,，可以靜養(yǎng)一段時(shí)間。給細(xì)胞一個(gè)適應(yīng)的時(shí)間,，不要一日看三回,，操之過(guò)急；如實(shí)驗(yàn)確實(shí)緊張,，可以使用中喬新舟細(xì)胞株*培養(yǎng)基,，此培養(yǎng)基是按細(xì)胞精心優(yōu)化，種類豐富,，適合中喬新舟任意一株細(xì)胞的培養(yǎng),。若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí),， 請(qǐng)務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,，確定細(xì)胞生長(zhǎng)適應(yīng)后，方進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。

2.FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)選擇相應(yīng)的血清 ，這點(diǎn)很重要,。

細(xì)胞復(fù)蘇的方法：

1.將培養(yǎng)基置于37 °C 水槽中回溫,， 回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之， 移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi),。

2.取出冷凍管,， 立即放入37 °C 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,， 否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部,，移入無(wú)菌操作臺(tái),。

3.依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取10 ml 培養(yǎng)基加至T25 或T75 flask中,。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻,，放入37 °C,，5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

4.對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,，1 % 以下的冷凍保護(hù)劑DMSO,，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍的 細(xì)胞中去除,，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可,。

5.對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO ,， 去除DMSO的方法如下：可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘,，小心移去上清液,，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后,，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,，再放入37 °C， 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

活細(xì)胞的處理方式︰

1. 細(xì)胞在寄送過(guò)程中,，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基,。收到后,，請(qǐng)檢查flask 外觀,，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)和有無(wú)污染現(xiàn)象，若有任何問(wèn)題,，不要打開(kāi)蓋子,，請(qǐng)立即通知我們。

2. 將原封的T25 flask細(xì)胞 靜置于細(xì)胞 培養(yǎng)箱中,，讓細(xì)胞穩(wěn)定一下,，并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。2-4小時(shí)后,，無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),，如無(wú)需傳代,，請(qǐng)置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，如細(xì)胞已達(dá)到85%以上的密度,，請(qǐng)立即將細(xì)胞做傳代處理,。