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當(dāng)前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>影響ELISA試劑盒試驗(yàn)成果的要素
ELISA試劑盒,,即酶聯(lián)免疫法,。ELISA法具有靈敏度高,、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn),,并具有操作簡(jiǎn)潔,、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn),因此多年來廣泛應(yīng)用于各高校,、醫(yī)院,、血站和科研機(jī)構(gòu)的試驗(yàn)室中。
影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面:
一,、試劑盒?
1,、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)下降或失活,,成果不易判別,。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反響靈敏度也高,,試驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽性,;
2、酶結(jié)合物濃度過高,,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高,。
二、試驗(yàn)儀器
1,、加樣器是否通過校正,,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的功能不好,,吸取樣品不,,會(huì)使成果忽高忽低;
2,、每次洗板前,,應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無阻塞,。
三、ELISA試劑盒操作
1,、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用,,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,避免形成試驗(yàn)成果假性下降,;
2,、加樣時(shí)留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗(yàn)成果的精確性,;
3,、洗刷不充分,會(huì)使成果假性增高,,過分洗刷呈假陰性,;
4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物,、無水汽,,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;
5,、抗原與抗體反響達(dá)到*平衡,,依賴于溫度與時(shí)刻。溫度高于45℃易引起失活及符號(hào)物掉落,,溫度低于4℃,,影響反響速度。
總歸,,由于ELISA試劑盒試驗(yàn)的影響要素較多,,在實(shí)踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),,避免和排除各種要素的影響,,使之得到精確可靠的查驗(yàn)成果。
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