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抗體的特異性斷定
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干,??贵w的特異性高,它的辨認(rèn)才干就強(qiáng),。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明,。交叉反應(yīng)率可用競賽克制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線,,核算各自的結(jié)合率,,求出各安閑IC50時的濃度,并按公式核算交叉反應(yīng)率,。
假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,,即該血清的特異性較好,。
拓展延伸:
1. 抗體的效價斷定
不管是用于確診仍是用于醫(yī)治,制備抗體的目的都是要求較價,。不同的抗原制備的抗體,,要求的效價紛歧。斷定效價的辦法很多,,包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂分散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的斷定效價的辦法,,以資比較,。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂分散試驗(yàn)來斷定,。
2. 抗體的親和力斷定
抗體的親和力是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的凹凸是由抗原分子的巨細(xì)、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原抉擇簇之間立體構(gòu)型的合適度抉擇的,。有助于保持抗原抗體復(fù)合物安穩(wěn)的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K標(biāo)明,K的單位是L/mol,,一般K的范圍在108~1010/mol,,也有多達(dá)1014/mol??贵w親和力的測定對抗體的挑選,,確認(rèn)抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。
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