花生粕是從仁經(jīng)壓榨提煉油料后的產(chǎn)品，而花生粕的營養(yǎng)價值較高,， 其代謝能是粕類飼料中zui高的,， 粗蛋白質(zhì)含量接近大豆粕,，高達(dá)達(dá)48%以上。
可使用沛歐凱氏定氮儀SKD-100及紅外石英消化爐SKD-08S2來測定其粗蛋白含量,，（若蛋白質(zhì)的含氮量已知時,，則可用此法測定樣品中蛋白質(zhì)的含量。）
當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)與濃硫酸共熱時,，其中的碳,、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮則轉(zhuǎn)變成氨,，并進(jìn)一步與硫酸作用天生硫酸銨,。此過程通常稱為“消化”。但是,，這個反應(yīng)進(jìn)行得比較緩慢,，通常需要加進(jìn)硫酸鉀或硫酸鈉以進(jìn)步反應(yīng)液的沸點(diǎn)，并加進(jìn)硫酸銅作為催化劑,，以促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行,。消化完成后，在凱氏定氮儀中加進(jìn)濃堿,，可使消化液中的硫酸銨分解,，游離出氨，借助水蒸汽蒸餾法,，將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定量,、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后,，氨與溶液中氫離子結(jié)合,，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變,，然后用標(biāo)準(zhǔn)無機(jī)鹽酸滴定,，直至恢復(fù)溶液中原來的氫離子濃度為止。根據(jù)所用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的量可計算出待測物中的總氮量,。蛋白質(zhì)的含氮量為16%,，即1克蛋白質(zhì)中的氮相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)，用凱氏定氮法測出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質(zhì)的含量,。
1 實(shí)驗材料
1.1 器材
SKD-100凱氏定氮儀 ,、SKD-08S2紅外石英消化爐（消化爐可以任意選擇消化孔數(shù)，而不影響熱量散失）1.2 試劑
實(shí)驗材料
器材
300ml凱氏燒瓶 4個,；
移液管,；錐形瓶；
試管；
小玻璃珠
試劑
98%濃硫酸分析純,；
35％氫氧化鈉溶液,；
2％硼酸溶液；
標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液（0.01mol／L）,。
粉末硫酸鉀-硫酸銅混合物 ：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合,。
混合指示劑（田氏指示劑）：由50ml 0.1％甲烯藍(lán)乙醇溶液與200ml 0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯于棕色瓶中備用,。
樣品溶液：配制3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品,。
2.實(shí)驗步驟
安裝凱氏定氮儀。
消化：取4個300ml凱氏燒瓶并標(biāo)號,各加1顆玻璃珠,，在1號及2號瓶中各加樣品1ml,，催化劑（K2SO4- CuSO4·5H2O）200 mg，濃硫酸5 ml,。留意加樣品時應(yīng)直接送進(jìn)瓶底,，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號及4號瓶中各加1 ml蒸餾水和與1,、2號瓶相同量的催化劑和濃硫酸,，作為對照。在透風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行消化,。在消化開始時應(yīng)控制火力,，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開始分解并放出SO2白煙后,，適當(dāng)加強(qiáng)火力,，繼續(xù)消化，直至消化液呈透明淡綠色為止,。撤掉火力,，冷卻至室溫。 （上海沛歐SKD-08S2消化爐可編程設(shè)定消化爐消化樣品的升溫曲線）
蒸餾： 蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀,，在蒸汽發(fā)生器中加進(jìn)用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑,，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后,，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶,，繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色,，如不變色則證實(shí)蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈,。移走錐形瓶，停止加熱,，打開夾子,。 （沛歐skd-100可以設(shè)定清洗程序）
蒸餾：設(shè)定取30％的氫氧化鈉溶液10ml,，向玻璃杯中加進(jìn)蒸餾水約5ml稀釋液，設(shè)定蒸餾時間5分鐘,，開始蒸餾,。氨氣進(jìn)進(jìn)錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色,。再繼續(xù)下一個蒸餾操縱。待樣品和對照均蒸餾完畢后,，同時進(jìn)行滴定,。
滴定：用0.01mol／L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點(diǎn),。
結(jié)果計算：
其中：
A為滴定樣品用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù),；
B為滴定對照液用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù)；
C為所取樣品溶液的ml數(shù)
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