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一． 原理

  凱氏法測定樣品中的含氮量,，即在催化劑作用下,，用硫酸破壞有機物，使含氮物轉化成硫酸銨,。加入強堿進行蒸餾使氨逸出,，用硼酸吸收后，再用酸滴定,，測出氮含量,，將結果乘以換算系數(shù)6.25，計算出粗蛋白含量,。

二． 試劑

1. 硫酸：化學純,，含量為98%，無氮,。
2. 混合催化劑：1g硫酸銅,，9g硫酸鉀，均為化學純,，磨碎混勻,。
3. 氫氧化鈉：化學純，40%水溶液（m/v）,。5%水溶液（m/v）
4. 硼酸：化學純,，2%水溶液（m/v）。
5. 混合指示劑：甲基紅0.1%乙醇溶液,，溴甲酚綠0.5%乙醇溶液,，兩溶液等體積混合，在陰涼處保存期為三個月,。
6. 鹽酸標準溶液：c(HC1)=0.1mol/L,。8.3ml鹽酸（分析純），注入1000ml蒸餾水中,。
7. 硼酸吸收液：2%硼酸溶液（20 g/L）：稱取100 g 硼酸,，加水溶解后并稀釋至5000 mL,。加入（1：3.5混合指示劑6ML）搖勻,，再加入5%的氫氧化鈉稀釋溶液0.35ML搖勻,，顏色呈紫紅色。

三． 儀器設備

1. 實驗室用樣品粉碎劑或研缽
2. 分樣篩：40目（孔徑0.45mm）
3. 分析天平：感量0.0001g
4. 消化爐（SKD-08S2）
5. 容量瓶100ml
6. 滴定管：10,、25ml
7. 消化管：300ml
8. 定氮儀(SKD-2000)

四． 樣品的選取和制備

  樣品粉碎后全部通過40目篩,，裝于密封容器中，防止樣品成分的變化,。

五． 分析步驟

1. 樣品的消化

稱取樣品0.5~1g(含氮量5~80mg)準確至0.0002g,，放入消化管中，加入5g混合催化劑,，與樣品混合均勻,，再加入10ml硫酸，將消化管置于消化爐上加熱,，直至呈透明的藍綠色,，然后在繼續(xù)加熱，至少30分鐘,。

1. SKD-08S2消化爐
2. 6個樣品和2個空白）
3. ”SET”鍵+“A/M”鍵3秒,，跳出第二設置區(qū)程序參數(shù)修改界面。連續(xù)按“SET”鍵數(shù)次出來
4. “RUN”=“3”,，pro= “ 1 ”  ,，再設置r1 =200，T1=5分鐘,，c1=180度,，r2=180，T2=5,C2=250度,，r3=180,， T3=5, C3=350度，r4=200,，T4=60,，c4=410，r5=0,，T5=0,C5=0度,。。,。,。r32=0,t32=0,c32=0,設置好后等幾秒鐘，程序會自動保存,。
5. -----------程序自動運行,，自動結束,。如果出現(xiàn)不運行，再檢查“RUN”設置為“3”,，pro= “ 1 ”  ,。

1. SKD-2000全自動定氮儀
2.  
3. 45ml，稀釋液40ml,，標準酸0.0953（mo/l）,，蒸餾功率100%，蒸餾時間6分鐘,，硼酸儀器自動加,。
4.  

平均值：12.8245

RSD（相對標準偏差值）: 0.002%