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用上海沛歐定氮儀怎樣測(cè)定花生粕和豆粕用定氮儀測(cè)定粗蛋白含量,？

       用于測(cè)定有機(jī)物的含氮量,若蛋白質(zhì)的含氮量已知時(shí),，則可用此法測(cè)定樣品中蛋白質(zhì)的含量。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)與濃硫酸共熱時(shí),，其中的碳,、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變成氨,，并進(jìn)一步與硫酸作用生成硫酸銨,。此過(guò)程通常稱為“消化”,。但是，這個(gè)反應(yīng)進(jìn)行得比較緩慢,，通常需要加入硫酸鉀或硫酸鈉以提高反應(yīng)液的沸點(diǎn),，并加入硫酸銅作為催化劑，以促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行,。消化完成后,，在凱氏定氮儀中加入濃堿，可使消化液中的硫酸銨分解,，游離出氨,，借助水蒸汽蒸餾法，將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定量,、一定濃度的硼酸溶液中,，硼酸吸收氨后，氨與溶液中氫離子結(jié)合,，使溶液中的氫離子濃度降低,，指示劑顏色改變，然后用標(biāo)準(zhǔn)無(wú)機(jī)鹽酸滴定,，直至恢復(fù)溶液中原來(lái)的氫離子濃度為止。根據(jù)所用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的量可計(jì)算出待測(cè)物中的總氮量,。蛋白質(zhì)的含氮量為16%,，即1克蛋白質(zhì)中的氮相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)，用凱氏定氮法測(cè)出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質(zhì)的含量,。

1 實(shí)驗(yàn)材料 1.1 器材    上海沛歐SKD-100定氮儀 ,、消化爐SKD-08S2    1.2 試劑2 實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)材料
器材
上海沛歐凱氏定氮儀 1套（SKD-08S2消化爐可以任意選擇消化孔數(shù)，而不影響熱量散失）,；
300ml凱氏燒瓶 4個(gè),；
移液管；錐形瓶,；
試管,；
小玻璃珠
試劑
98%濃硫酸分析純；
35％氫氧化鈉溶液,；
2％硼酸溶液,；
標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液（0.01mol／L）。
粉末硫酸鉀—硫酸銅混合物 ：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合,。
混合指示劑（田氏指示劑）：由50ml 0.1％甲烯藍(lán)乙醇溶液與200ml 0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成,，貯于棕色瓶中備用。
樣品溶液：配制3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品,。
實(shí)驗(yàn)步驟
安裝凱氏定氮儀,。
        消化：取4個(gè)300ml凱氏燒瓶并標(biāo)號(hào),各加1顆玻璃珠,，在1號(hào)及2號(hào)瓶中各加樣品1ml，催化劑（K2SO4- CuSO4·5H2O）200 mg,，濃硫酸5 ml,。注意加樣品時(shí)應(yīng)直接送入瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上,。在3號(hào)及4號(hào)瓶中各加1 ml蒸餾水和與1,、2號(hào)瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對(duì)照,。在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行消化,。在消化開始時(shí)應(yīng)控制火力，不要使液體沖到瓶頸,。待硫酸開始分解并放出SO2白煙后,，適當(dāng)加強(qiáng)火力，繼續(xù)消化,，直至消化液呈透明淡綠色為止,。撤掉火力，冷卻至室溫,。 （上海沛歐SKD-08S2消化爐可編程設(shè)定消化爐消化樣品的升溫曲線）
蒸餾：
       蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀,，在蒸汽發(fā)生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀,。約15分鐘后,，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘,，觀察錐形瓶?jī)?nèi)的溶液是否變色,，如不變色則證明蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶,，停止加熱,，打開夾子。 （沛歐skd-100可以設(shè)定清洗程序）
蒸餾：設(shè)定取30％的氫氧化鈉溶液10ml,，向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml稀釋液,，設(shè)定蒸餾時(shí)間5分鐘，開始蒸餾,。氨氣進(jìn)入錐形瓶,，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。再繼續(xù)下一個(gè)蒸餾操作,。待樣品和對(duì)照均蒸餾完畢后,，同時(shí)進(jìn)行滴定。
滴定：用0.01mol／L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量,，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點(diǎn),。
結(jié)果計(jì)算：

其中：

A為滴定樣品用去的鹽酸溶液平均ml數(shù),；

B為滴定對(duì)照液用去的鹽酸溶液平均ml數(shù)；

C為所取樣品溶液的ml數(shù),。