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北京西美杰科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 生物學(xué)檢測(cè)試劑盒,化學(xué)試劑,蛋白質(zhì)氧化損傷,抗原抗體 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
- 型號(hào) a5240
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- 廠商性質(zhì) 代理商
- 所在地 北京市
更新時(shí)間：2015-10-23 13:57:48瀏覽次數(shù)：2277
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一說起支原體，估計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)的人員就開始手心冒汗了,。細(xì)胞培養(yǎng)中的急性污染很容易察覺,，而支原體則能殺細(xì)胞于無形中。除了非常有經(jīng)驗(yàn)的老手,，很多實(shí)驗(yàn)人員都察覺不到支原體的污染,，據(jù)統(tǒng)計(jì)，超過25%的細(xì)胞系中感染了支原體,，而研究者大多并不知曉,。早期，血清可能是zui主要的污染源,；之后,，通過實(shí)驗(yàn)室的儀器、培養(yǎng)基或其他試劑慢慢蔓延開來,，細(xì)胞無不中招,。怎樣才能*討厭的支原體污染呢？讓我們先來認(rèn)識(shí)這個(gè)小東西,。
狡猾的支原體
支原體是*一種沒有細(xì)胞壁的原核生物,，大多呈不規(guī)則球狀或絲狀。由于它的直徑小,，而且形狀靈活,，所以能逃過實(shí)驗(yàn)室常用的濾膜。
檢測(cè),、檢測(cè),、再檢測(cè)
對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行常規(guī)的支原體檢測(cè)非常重要。盡管各個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)頻率不同,，從幾個(gè)星期到幾個(gè)月不等,，不過這主要取決于你們實(shí)驗(yàn)室有多少人接觸細(xì)胞,，以及你們引進(jìn)新細(xì)胞的頻率。比如美國(guó)國(guó)立細(xì)胞培養(yǎng)中心,，它經(jīng)常從其他實(shí)驗(yàn)室獲得細(xì)胞培養(yǎng)物,，就會(huì)對(duì)每個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，并將它們隔離,，直至zui后證明沒有支原體污染,。支原體清除試劑，每?jī)扇齻€(gè)月進(jìn)行一次定期檢測(cè)是必要的,。如果有新細(xì)胞進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,，或準(zhǔn)備將細(xì)胞進(jìn)行液氮保存,，都應(yīng)該進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)然,，如果細(xì)胞不大對(duì)勁，應(yīng)立馬檢測(cè),。
支原體檢測(cè)：
檢測(cè)頻率是一方面,，選擇合適的檢測(cè)方法也很重要,。到底是PCR、生化分析,，ELISA還是免疫熒光呢,？PCR應(yīng)該是檢測(cè)支原體的理想方法,，他綜合了幾個(gè)優(yōu)勢(shì),，靈敏,、特異,、快速,、廉價(jià)等,。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以直接用來檢測(cè)，非常方便,。Applichem公司提供的高靈敏度PCR Mycoplasma Test Kit（A3744）,該試劑盒引物源于支原體基因的保守序列,，而且即用型的PCRmix使您的使用更加方便，同時(shí)更是提供了陽(yáng)性對(duì)照,。當(dāng)然為了避免假陽(yáng)性和假陰性,，試驗(yàn)中必須設(shè)立多種對(duì)照：除了陽(yáng)性對(duì)照外，還有陰性對(duì)照和內(nèi)對(duì)照,。
用Hoechst33258染料檢測(cè)支原體是很多教科書上推薦的方法,。由于支原體含有DNA，能與Hoechest33258染料結(jié)合,，在500倍數(shù)放大情況下,，表現(xiàn)為細(xì)胞顆?；蚶w毛染色。但操作過程較為繁瑣,，且需要一定的經(jīng)驗(yàn)辨別支原體,，新手可能大不容易掌握,。
支原體污染和清除：
如果很不幸，你的細(xì)胞已經(jīng)感染了支原體,，怎么辦？大部分人的想法可能都是把感染的細(xì)胞扔掉,，重新開始。一旦感染了支原體,，細(xì)胞復(fù)原的機(jī)會(huì)很小,。所以在液氮中多儲(chǔ)存一些備份還是比較明智的選擇：支原體清除試劑。
如果你的細(xì)胞非常稀有且珍貴,，那只能去奮力搶救了,。拿什么拯救你，我的細(xì)胞,？由于支原體沒有細(xì)胞壁,，且代謝慢,，故大部分傳統(tǒng)的抗生素都不奏效,。但是北京西美杰公司提供了一些Applichem的。Myco-3（A5240）,，Myco-1（A5222）Myco-2（A5233）,。這三類是有多種支原體敏感的抗生素研制而成,，無細(xì)胞毒性,。100倍濃縮液直接加入培養(yǎng)基，使用方便。具體的使用方法如下：
Myco-3加入培養(yǎng)基中,，每2-3天換液一次,，連續(xù)處理14天,，可有效清除絕大多數(shù)支原體污染,。
頑固支原體需Myco-1和Myco-2聯(lián)合使用：Myco-1處理4天后換Myco-2處理3天,，如此重復(fù)2-3次,。
支原體預(yù)防：
雖然說支原體可以鏟除,，但這種勞心勞力的事情估計(jì)沒有人愿意做，那么平時(shí)的預(yù)防更重要,。北京西美杰公司還提供了幾樣好東西，能預(yù)防支原體的污染,。具體介紹如下Incubator-Clean（A5230）
用于CO2培養(yǎng)箱的消毒,，噴一噴,，*預(yù)防支原體,、細(xì)菌和病毒等的污染,。
Incuwarter-Clean（A5219）
用于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)保持空氣濕度的水源消毒,，100*即用型濃縮液。
Aquabator-Clean（A5225）
用于水浴的消毒,，有效防止各類污染,。
需要特別提及的是，液氮罐中也可能有支原體,。支原體能耐受液氮的低溫,，雖然不會(huì)增殖，但會(huì)污染你的細(xì)胞,。因此,，細(xì)胞凍存管還是不要放在液氮內(nèi),，以免液氮滲進(jìn)入細(xì)胞,，而是儲(chǔ)藏在液氮的氣相中。
不過,，預(yù)防支原體污染的方法,，還是良好的細(xì)胞培養(yǎng)技巧和正確的態(tài)度,。雖然這些都是老生常談，但一旦熟悉了細(xì)胞培養(yǎng),，就很容易麻痹大意,，時(shí)常敲敲警鐘還是相當(dāng)必要的。下面我將北京西美杰公司提供的有關(guān)支原體預(yù)防,，檢測(cè)和清除的產(chǎn)品做一個(gè)總結(jié)：
支原體預(yù)防：
品牌 | 貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
Applichem | A5230 | Incubator-Clean™ | 500ml/1L | 1036/1884 |
Applichem | A5219 | Incuwater-Clean™ | 100ml | 436 |
Applichem | A5225 | Aquabator-Clean™ | 50ml | 436 |
支原體檢測(cè)：
品牌 | 貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
Applichem | A3744 | PCR Mycoplasma Test Kit | 10T/20T | 3124/5192 |
支原體清除：
品牌 | 貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
Applichem | A5222 | Myco-1 | 10ml/20ml/100ml | 884/1537/6140 |
Applichem | A5233 | Myco-2 | 10ml/20ml/100ml | 695/1052/4145 |
Applichem | A5240 | Myco-3 | 10ml/20ml/100ml | 489/884/3560 |
除了支原體污染清除,，支原體預(yù)防，檢測(cè)和清除方面的試劑外,，北京西美杰公司還提供了Applichem細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)方面的其他試劑,，包括各種細(xì)胞培養(yǎng)基，氨基酸,，抗生素以及糖和鹽類,。同時(shí)也包含了常用的其他生化試劑，如有需要可隨時(shí)我們的：.
