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北京西美杰科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 生物學(xué)檢測(cè)試劑盒,化學(xué)試劑,蛋白質(zhì)氧化損傷,抗原抗體 |
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- 型號(hào) Cell Biolabs
- 品牌 Cell Biolabs
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- 所在地 北京市
更新時(shí)間：2021-09-17 15:03:57瀏覽次數(shù)：1239
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常用的病毒基因傳遞載體包括逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）,、腺病毒（AdV）、腺相關(guān)病毒（AAV）,、慢病毒（LV）和單純皰疹病毒（HSV）,。其中，AAV屬于細(xì)小病毒科,，是其中最小的單鏈和無(wú)囊膜DNA病毒,，目前已發(fā)現(xiàn)的血清型有11種。在所有不同血清型的AAV中,，重組AAV-2是常用的一種,，它可以通過(guò)輔助病毒或Cell Biolabs提供的AAV Helper-Free System來(lái)體外生產(chǎn)出高滴度的重組病毒。AAV-2可以感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞,，并能在人類(lèi)宿主細(xì)胞中維持,，具有一定的基因穩(wěn)轉(zhuǎn)潛力。由于AAV-2是一種天然缺陷型病毒,，需要在反式結(jié)構(gòu)中提供若干因子才能進(jìn)行生產(chǎn)性感染,，因此被*為的病毒載體。近年來(lái),，利用DNA重組技術(shù)開(kāi)發(fā)了一種新型的載體AAV-DJ，是從8種不同血清型AAV重組而來(lái)的一個(gè)混合衣殼,，使其能在各種不同細(xì)胞和組織中都具有顯著較高體外感染效率的載體,。重組的AAV-2和AAV-DJ病毒都可通過(guò)CsCl梯度超離法、碘二醇密度梯度超離法或Cell Biolabs的AAV純化試劑盒來(lái)純化,。
利用病毒載體來(lái)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因必須要準(zhǔn)確地測(cè)量病毒滴度,。傳統(tǒng)檢測(cè)AAV滴度是通過(guò)DNA斑點(diǎn)雜交或類(lèi)似方法來(lái)定量AAV基因組拷貝數(shù)（GC）。然而這些方法耗時(shí)耗力,，且穩(wěn)定性不佳,。對(duì)于已經(jīng)高度純化的病毒樣品,，也通常用其在260nm的吸光度來(lái)估算病毒粒子總數(shù)，但這種方法不適用于未純化的病毒上清,，因?yàn)槠渲械碾s質(zhì)成分會(huì)影響260nm的光吸收度,。
腺相關(guān)病毒（AAV）滴度檢測(cè)試劑盒
西美杰代理的Cell Biolabs提供了一種快速全面的用于檢測(cè)純化后的AAV滴度的試劑盒QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit。該試劑盒包含一個(gè)96孔板和足夠檢測(cè)96個(gè)樣本的試劑,，包括已滅活的AAV標(biāo)準(zhǔn)品,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線能夠計(jì)算出樣品中純化后的AAV滴度。該試劑盒檢測(cè)靈敏度為6.25×108 GC/mL,，能夠檢測(cè)AAV-1,，AAV-2，AAV-3,，AAV-5,，AAV-6，AAV-8,，AAV-9,，AAV-10，AAV-DJ和AAV-DJ/8多種血清型的AAV滴度,，并且適用于所有表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的AAV,。
檢測(cè)原理
AAV衣殼是由VP1、VP2和VP3三種蛋白質(zhì)混合構(gòu)成,，平均每一個(gè)病毒粒子中包含60個(gè)VP分子,，其比例為5 VP1 : 5 VP2 : 50 VP3。試劑盒中提供的96孔板已預(yù)包被了可以結(jié)合三種VP蛋白的捕獲抗體,，當(dāng)AAV樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入到96孔板中,，其AAV衣殼蛋白就會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。經(jīng)過(guò)孵育和洗板等步驟后,，再分別加入AAV VP衣殼抗體和HRP標(biāo)記的二抗,，而未結(jié)合的抗體將被洗脫下來(lái)。經(jīng)底物顯色后,，測(cè)定450nm處的吸光度,，最后通過(guò)AAV標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣品中AAV衣殼蛋白濃度，進(jìn)而計(jì)算出樣本中AAV滴度,。
產(chǎn)品特點(diǎn)
通過(guò)檢測(cè)純化后的重組AAV衣殼蛋白來(lái)確定AAV滴度,；
AAV定量結(jié)果由標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)儀讀取,；
試劑盒中提供滅活的AAV標(biāo)準(zhǔn)品,；
適用于多種血清型AAV滴度測(cè)定，包括AAV-1, AAV-2, AAV-3, AAV-5, AAV-6, AAV-8, AAV-9, AAV-10, AAV-DJ and AAV-DJ/8
腺相關(guān)病毒（AAV）滴度檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品信息
品名 | 規(guī)格 | |
VPK-5146 | QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit | 96 assays |
VPK-5146-5 | QuickTiter™ AAV Titer ELISA Kit | 5 x 96 assays |
Cell Biolabs公司坐落于美國(guó)加利福尼亞州圣地亞哥市，一直致力于開(kāi)發(fā)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的技術(shù)和工具,，并將所開(kāi)發(fā)的創(chuàng)新性技術(shù)成果商業(yè)化,。Cell Biolabs孜孜不倦的完善產(chǎn)品，以期使細(xì)胞功能和疾病機(jī)制研究達(dá)到新高度,。Cell Biolabs公司的產(chǎn)品有特色并且處于行業(yè)前沿水平,，全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu),、生物,、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用。北京西美杰科技有限公司是Cell Biolabs中國(guó)一級(jí)代理,，為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù),。
引用文獻(xiàn)
1. Rabinowitz, J, and Samulski, R. J. (1998) Curr. Opin. Biotechnol., 9, 470-475.
2. Summerford, C., and Samulski, R. J. (1999) Nat. Med., 5, 587-588.
3. Clark, K., Liu, X., McGrath, J., and Johnson, P. (1999) Hum. Gene Ther., 10, 1031-1039.
4. Sonntag, F., Schmidt, K., and Kleinschmidt, J.A. (2010) Proc Natl Acad Sci U S A., 107, 10220-5.
