大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）水平。用純化的大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX），再與HRP標(biāo)記的Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的,。顏色的深淺和樣品中的Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）濃度,。
大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）試劑盒操作步驟
1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3,。
8.         洗滌：操作同5,。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。
11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 

保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）試劑盒有效期：6個(gè)月