溫育是ELISA試劑盒測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA實驗作為一種固相免疫測定,，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間,。溫育所需時間與溫度成反比,，即溫度越高，則所需時間相對較短,。在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，也被稱之為孵育,。這是一個逐步平衡的過程,，因此需經(jīng)擴散才能達到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。

溫育常采用的溫度有43℃,、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。實驗表明,，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,，產(chǎn)物的生成可達。為加速反應(yīng),，可提高反應(yīng)的溫度,，ELISA試劑盒有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度,?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中放置一晚上,，以形成zui多的沉淀,。但因所需時間太長,，在ELISA中一般不予采用,。