二,、注意事項

1. 此試劑為體外檢測試劑,，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物,，不同總批號的試劑不能混用,。

2．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,，

3．濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘。

4．濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘

5．若24小時內(nèi)進行實驗,，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時實驗,，標(biāo)本-20℃保存,，避免反復(fù)凍融。

6．在反復(fù)清洗微孔板,，并扣干微孔中的殘余液體,，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像,。

7．加樣完畢后,，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻,。

8．試劑盒保存于2～8℃,，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示,。

三,、實驗前準(zhǔn)備

1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘。

2．準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料,，如微量移液器,，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等

3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液

4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液

5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,，充分混勻待用。）

四,、操作步驟

1．取出酶標(biāo)板,，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中

2、分別標(biāo)記樣品編號,，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）,。

3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘,；

4,、將酶標(biāo)板板取出，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

6,、重復(fù)第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

7,、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液,。

8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘,。

9,、將酶標(biāo)板取出，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體。

10,、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。

11,、重復(fù)第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

12,、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl,。輕輕振蕩混勻。（A液,、B液采用不同的吸頭加樣）

13,、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。

14,、每個微孔中加入50μl的終止液,，輕輕振蕩混勻,。

15,、在酶標(biāo)儀上，450nm處測定OD; 顯色后,，15分鐘內(nèi)進行測定,。

16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，計算樣本含量

五,、結(jié) 果判斷

1. 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；

2,、檢測值范圍：0－80IU/L

3,、敏感度：0.1IU/L

人（human）單純皰疹病毒1型抗原（HSV1-Ag）

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