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細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1. 細(xì)菌污染 

細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,，也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽３Ｒ姷挠懈锾m氏陽性菌,，如枯草桿菌以及大腸桿菌,、假單胞菌等革蘭氏陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見,。 

培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,，會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,，胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,，圓脫落死亡,。 

2.真菌污染 

真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的一種，常見的真菌有煙曲霉,、黑曲菌,、孔子霉、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌,。 

培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點(diǎn),，有的散在生長(zhǎng),，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,，有的呈鏈狀排列。 

真菌污染后,，細(xì)胞生長(zhǎng)變慢,，但后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。 

3. 支原體污染 

支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨(dú)立生活的微生物,，小直徑0.2μm,，一般過濾除菌無法去除它，光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu),。開始不易發(fā)現(xiàn),，能在偏堿條件下生存，對(duì)有抗藥性,。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間,。 

培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后，部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變慢,，部分細(xì)胞變圓,，從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化,，或略有變化,，若不及時(shí)處理，還會(huì)產(chǎn)生交叉污染,。 

4. 病毒污染 

 組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，如果沒有除去潛在的病毒,，就會(huì)產(chǎn)生病毒污染。目前,，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。

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