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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域教您一抗/二抗該怎么選?
我們?cè)谏钪薪?jīng)常會(huì)面臨做選擇這樣的一個(gè)難題,,其實(shí)做選擇本身并不是多么困難的事情,,關(guān)鍵在于您是否了解自己內(nèi)心真正需要的是什么,。就好比我們的實(shí)驗(yàn)者在選擇產(chǎn)品的品牌,、質(zhì)量,、規(guī)格等,,根據(jù)這些信息再去做相關(guān)的判斷。比如zui簡單的一個(gè)例子,,不少的伙伴都對(duì)一抗,、二抗的選擇方面甚是苦惱,,那如何選擇呢,研域教您,!
擇一抗宿主物種
通常,,當(dāng)使用偶聯(lián)二抗檢測(cè)未偶聯(lián)一抗時(shí),產(chǎn)生抗體的宿主動(dòng)物物種就顯得非常重要,。對(duì)于免疫組織化學(xué),,產(chǎn)生一抗的物種應(yīng)盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白間發(fā)生潛在交叉反應(yīng)性,。更為恰當(dāng)?shù)倪x擇是來源于兔的一抗,,然后是偶聯(lián)于檢測(cè)分子的抗兔IgG二抗。如果可提供偶聯(lián)一抗,,則可避免此問題,。對(duì)于使用不包含內(nèi)源性免疫球蛋白的樣品的其它技術(shù),宿主物種的選擇則不那么重要,。
組織裂解物和組織培養(yǎng)物上清液包含免疫球蛋白。對(duì)還原,、變性樣品進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡時(shí),,IgG會(huì)以50和25kDa的條帶顯現(xiàn),這兩個(gè)條帶分別對(duì)應(yīng)于IgG分子的重鏈和輕鏈,。
選擇二抗
二抗應(yīng)來源于與所使用一抗相同的物種,。例如,如果您的一抗為小鼠單克隆抗體,,那么就需選抗小鼠二抗,。我們推薦您查看二抗的數(shù)據(jù)表以確保它已在您將要使用的應(yīng)用中進(jìn)行了測(cè)試。
抗體數(shù)據(jù)表列出了已經(jīng)過測(cè)試并證明行之有效的應(yīng)用,。如果未列出某項(xiàng)應(yīng)用,,并不表示該抗體不適于該應(yīng)用。它只是表示尚未經(jīng)過測(cè)試并且抗體表現(xiàn)如何未知,。當(dāng)應(yīng)用已經(jīng)過測(cè)試并證明無效時(shí),,數(shù)據(jù)表上會(huì)加以說明。
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