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產(chǎn)品的保存方法與質(zhì)量有著莫大的關(guān)系,有不少老師反映出在保存血清的時(shí)候會(huì)遇見(jiàn)“什么溫度zui合適”“怎樣避免沉淀物出現(xiàn)”等等問(wèn)題,。而實(shí)驗(yàn)新手們?cè)诒4妗究蒲醒濉繒r(shí)也難免會(huì)遇見(jiàn)一些突發(fā)問(wèn)題,,那么我們要如何隨機(jī)應(yīng)變呢?
1. 問(wèn):保存血清的方法是怎樣的呢,?
答:我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃,。然而,若存放于4℃時(shí),,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月,。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍,。
2. 問(wèn):如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損,?
答:我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
3. 問(wèn):血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理?
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜,。
4. 問(wèn):為什么要熱滅活【科研血清】?
答:加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。啟動(dòng)的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在免疫學(xué)研究,,培養(yǎng)ES細(xì)胞,,昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清,。
5. 問(wèn):有必要做熱滅活嗎?
答:實(shí)驗(yàn)顯示,,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),,或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓钠焚|(zhì),,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低,。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點(diǎn)”,,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。 因此我們建議您,,若非必須,,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái),,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,,更確保血清的品質(zhì)!
6. 問(wèn):為什么儲(chǔ)存在冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?
答:我們的胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁,。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的品質(zhì)。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,,避免反復(fù)凍融,。
溫馨提示:
1. 解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2. 解凍血清時(shí),,請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。
3. 請(qǐng)勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,,而影響血清的品質(zhì)。
4. 若必須做血清的熱滅活,,請(qǐng)遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過(guò)高,,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多,。
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