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細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類標(biāo)本: 包含血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
血清:
室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,。保存過程中如有沉積形成,,應(yīng)再次離心。
血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。細(xì)心搜集上清,。保存過程中如有沉積形成,應(yīng)再次離心,。
尿液: 用無菌管搜集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,。保存過程中如有沉積形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。
細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集,。
ELISA試劑盒的試驗條件如下:
1,、固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板,、試管,、珠粒等。
2,、包被抗體或抗原的挑選:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。
3,、 酶符號抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行開始效價的滴定,。然后再固定其它條件或采取“方陣法",在正式試驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度,。
4,、酶的底物及供氫體的挑選:對供氫體的挑選要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而自身無色,。有些供氫體有潛在的致癌作用,細(xì)胞因子ELISA試劑盒應(yīng)留意防護(hù)
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