在操作elisa試劑盒實驗前,，不少老師會找尋很多的相關實驗資料,，網上的資料一大堆，然而真正所能夠需要用到的技巧和注意也就那幾條,，熟練的了解并掌握之后再應用到實驗中就會簡單的多,。做好這幾條，Elisa試劑盒實驗高手不是夢,。

一,、加樣的經驗總結
    加樣或加試劑時，請注意在吸取標本/標準品,，酶結合物或底物時,，個孔與一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導致不同的 “預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性,。一次加樣時間控制 在10分鐘內,，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣,。 
二,、孵育的三條必知
    1.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,，酶標 板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā)；
    2.洗板后應盡快進行下步操作,，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài),；
    3.同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
三,、ELISA洗滌小技巧
    洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,，勿將濾紙直 接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響*后的酶標儀讀數,。 
四、反應時間的控制
    加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化（比如,，每隔 10分鐘）,，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數,。 
五、操作說明 
    1.封板膜只做一次性使用,。 
    2.標本中待測物質含量過高時先將樣本稀釋一定倍數后再測定,，計算時請乘以稀釋倍數。
    3.各步加樣均使用加樣器,，并經常校對其正確性,，一次加樣時間控制在5分鐘內（標本數目多的時候，上海研域推薦使用排槍加樣）,。
    4.液體標本置4℃保存應小于1周,，-20℃或-80℃均應密封保存，-20℃不應超過1個月,，-80℃不應超過2個月,；標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。