ELISA檢測系統(tǒng)可以說是現(xiàn)在使用多的檢測方法,，而且技術(shù)手段很多,，對于花板，假陽性，全顯色,，全部顯色,，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的作用,，一定要多注意,，那么elisa檢測系統(tǒng)穩(wěn)定，這些實驗過程都要注意,。

       常用鎖劑有：0.05%-0.5%的BSA,；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉,，比較價廉,，可以高濃度使用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等,。詳細(xì)的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,，看一下可不可以應(yīng)用到自己試驗當(dāng)中去。但選用什么,，要依據(jù)試驗詳細(xì)來實踐,。

 　　應(yīng)留意以下原理：因為蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量,、等電點,、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),，故更易吸附到固相載體表面,。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。

 　　還有有的包被原可能不是蛋白,，對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,，親和素生物素:先親和素先包被載體，加入生物素化的DNA,，這種包被方法平均,、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定,。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。

       包被原的性質(zhì)很重要,，蛋白濃度,，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,，所以保留抗原很重要,，我做重組蛋白時,，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。feng鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附,。但有時因為試驗的需要,，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。