【中國(guó)化工儀器網(wǎng) 技術(shù)前沿】單個(gè)細(xì)胞是地球上細(xì)胞生命體功能和進(jìn)化的基本單元,。單細(xì)胞精度的高通量功能分選是解析生命體系異質(zhì)性機(jī)制,、探索自然界微生物暗物質(zhì)的重要工具,。單細(xì)胞拉曼光譜(SCRS)能夠在無(wú)標(biāo)記、無(wú)損的前提下揭示細(xì)胞固有的化學(xué)組成,，因此拉曼激活細(xì)胞分選技術(shù)(RACS)日益受到關(guān)注,。但分選通量是當(dāng)前限制其廣泛應(yīng)用的瓶頸。中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所單細(xì)胞中心研究員馬波與徐健帶領(lǐng)的多學(xué)科交叉團(tuán)隊(duì),，通過(guò)耦合SCRS和液滴微流控技術(shù),，發(fā)明了拉曼激活單細(xì)胞液滴分選技術(shù)(Raman-activated single-cell Droplet Sorting; RADS)，這是目前已公開(kāi)報(bào)道的工作中分選通量zui高的RACS系統(tǒng),。相關(guān)研究工作在線(xiàn)發(fā)表在Analytical Chemistry上,。 　　科研人員前期發(fā)明了基于微流控芯片的流式RACS技術(shù)，通過(guò)集成基于介電的單細(xì)胞捕獲釋放和電磁閥吸吮技術(shù),，實(shí)現(xiàn)了高速流動(dòng)狀態(tài)下單細(xì)胞的捕獲,、拉曼采集、釋放和分選,，通量達(dá)~60個(gè)細(xì)胞/分鐘,。為了進(jìn)一步提高通量，研究人員提出,，單細(xì)胞經(jīng)液滴包裹后,，通過(guò)耦合介電可實(shí)現(xiàn)超高通量分選。液滴包裹不僅可以保護(hù)細(xì)胞免受分選過(guò)程中的損傷,，還可與分選后細(xì)胞的培養(yǎng),、DNA、RNA,、蛋白等的提取與分析等無(wú)縫銜接,。因此，RADS技術(shù)有著廣闊應(yīng)用前景,。 　　然而,，在RADS技術(shù)中存在諸多技術(shù)難題。首先,，液滴表面凸/凹的形狀會(huì)產(chǎn)生透鏡效應(yīng),，影響拉曼激光聚焦，降低空間分辨率,，導(dǎo)致無(wú)法獲取液滴中細(xì)胞的拉曼信號(hào),。其次,，單細(xì)胞液滴包裹需要油相的引入，而油相具有強(qiáng)拉曼背景,，會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞拉曼信號(hào)的獲取,。第三，如何實(shí)現(xiàn)拉曼采集,、分析、單細(xì)胞液滴包裹及分選的自動(dòng)化集成未見(jiàn)先例,。研究人員巧妙利用先獲取單細(xì)胞拉曼信號(hào),，后進(jìn)行單細(xì)胞液滴包裹的策略，有效解決了液滴對(duì)拉曼信號(hào)采集的影響,；在線(xiàn)集成液滴發(fā)生和分選同步進(jìn)行,，簡(jiǎn)化了系統(tǒng)操作步驟；zui后,，通過(guò)自主開(kāi)發(fā)的軟件,，實(shí)現(xiàn)了拉曼采集、分析,、單細(xì)胞液滴包裹及分選的高度自動(dòng)化,。該系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了高產(chǎn)蝦青素之雨生紅球藻的化(分選準(zhǔn)確率高達(dá)98.3%)、高通量(260細(xì)胞/分鐘)篩選,。研究表明,，分選后有92.7%的雨生紅球藻細(xì)胞保持活性并可增殖，和未經(jīng)分選的對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差異,，這說(shuō)明RADS技術(shù)充分保護(hù)了細(xì)胞的活性,。 　　前期研究已證明，基于單細(xì)胞拉曼成像的拉曼組(Ramanome)技術(shù)能夠非標(biāo)記,、非破壞性地識(shí)別與分析幾近無(wú)限的細(xì)胞功能,。與拉曼組技術(shù)相耦合的RADS將能夠高通量分選廣泛的細(xì)胞功能，從而允許下游特定功能單細(xì)胞的培養(yǎng)或組學(xué)分析,。這一工作為研制高度通量化與集成化的單細(xì)胞拉曼分選與測(cè)序系統(tǒng)奠定了基礎(chǔ),。 　　研究工作得到了得到了中科院儀器專(zhuān)項(xiàng)、國(guó)家自然科學(xué)基金,、中國(guó)博士后科學(xué)基金和山東省自然科學(xué)基金等的支持,。 　　編輯點(diǎn)評(píng) 　　單細(xì)胞精度的高通量功能分選是解析生命體系異質(zhì)性機(jī)制、探索自然界微生物暗物質(zhì)的重要工具,。單細(xì)胞拉曼光譜(SCRS)能夠在無(wú)標(biāo)記,、無(wú)損的前提下揭示細(xì)胞固有的化學(xué)組成，拉曼激活細(xì)胞分選技術(shù)(RACS)日益受到關(guān)注,。青島能源所發(fā)明拉曼激活單細(xì)胞液滴分選技術(shù),，為研制高度通量化與集成化的單細(xì)胞拉曼分選與測(cè)序系統(tǒng)奠定了基礎(chǔ),。 　　(原標(biāo)題：青島能源所發(fā)明拉曼激活單細(xì)胞液滴分選技術(shù))

（來(lái)源：青島生物能源與過(guò)程研究所）