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- 為什么色譜柱才用了三個月就壞了,，怎么解,！

- 樣品好臟！流動相好苛刻,！色譜柱特別容易壞,，怎么解！

- 已經(jīng)用了在線過濾器,，壓力沒增加,，色譜柱就是壞得快，怎么解,！

今天小編給大家介紹一下給液相色譜柱配個保護柱的重要性,。

關(guān)于保護柱，通常大家會擔(dān)心：

保護柱會不會造成選擇性變化,？

保護柱會不會造成柱效/分離度下降,？特別是精細分析？

好的保護柱,，是不是很貴,？

如何選擇保護柱,？

在使用保護柱的時候應(yīng)該注意些什么?

大家稍安毋躁，且聽小編一一道來,。

    在液相分析檢測樣品的過程中,，色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染，從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差,、壽命縮短,。

    來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,，以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒,。來自于樣品的污染主要指，未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜系統(tǒng)中,，由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。

    特別是對于中藥,、天然產(chǎn)物,、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質(zhì)的復(fù)雜性,，色譜柱受污染的情況會更加嚴重,。污染會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷,、填料變色等,，從而帶來檢測成本高，測試結(jié)果不準確等各種影響,。

    保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,，使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度，延長分析柱使用壽命,。

保護柱位于進樣器與分析柱之間,， 作用主要兩方面：

1. 截留不溶性顆粒 

2. 吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)

一、如何選擇保護柱,？

1. 保護柱的填料,，與分析柱保持一致！填料品牌一致,，才能100%確保選擇性一致,。

2.保護柱的規(guī)格，要與分析柱匹配,！填料粒徑一致,，保護柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。

3.對于精細分離,，保護柱本身的裝填柱效要足夠好,！

4.對于精細分離或者小內(nèi)徑色譜柱分離,，保護柱的連接死體積要盡可能小。

5.如果是用于UHPLC柱,，還要考慮保護柱的耐壓能力,。

    保護柱不理想，就會導(dǎo)致峰擴散,，分離度下降,，不利于精細分離。

    理想的保護柱,，即使分析柱短小如4.6×100mm,，安裝保護柱后也未引起分離度與峰高的降低。



二,、如何使用保護柱,？

1.專柱。避免保護柱成為不同項目的交叉污染源,。

2.及時更換保護柱,。當峰的理論塔板數(shù)下降15%，或是柱壓上升15%,，或是關(guān)鍵分離度下降15%時，都應(yīng)該及時更換保護柱,。

3.不慎發(fā)生強污染時,，可以將分析柱卸下，單獨沖洗保護柱,，可以使污染物更快的從保護柱中流出,。——但是不可以超聲保護柱。

三,、保護柱使用注意事項

1.獨立式保護柱與分析柱連接時,，連接管路盡可能短，且接口切面平滑,，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng),。

2.卡套式保護柱一般未標注液流方向，使用時要自行標注,，并按照標注方向來使用,，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱,。

3. 直接填裝的短柱型保護柱,，出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時，可不接分析柱進行反向清洗,，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑,。

4. 卡套式保護柱,，柱芯替換時，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配,，同時不易旋擰過緊,，以防滑絲。

5. 保護柱或柱芯一般不建議超聲清洗,，因可能對填料表面修飾有影響,。

6. 如同一保護柱配不同的分析柱使用，每次使用前,，保護柱需先清洗并用流動相平衡保護柱一段時間后,，再接分析柱使用。