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1.
農(nóng)殘試劑配置
緩沖溶液：
取一包緩沖劑,，
加入
500ml
蒸餾水,，
溶解攪拌均勻,，
密閉,、
避光、
陰涼處保存,。
顯色劑：取顯色劑一瓶,，加入
15ml
緩沖溶液溶解,，
4
℃冰箱中保存,。
底物：取底物一瓶，加入
15ml
蒸餾水溶解,，
4
℃冰箱中保存,。
乙酰膽堿酯酶：
取乙酰膽堿酯酶一瓶，
用
3ml
緩沖溶液溶解,，
4
℃冰箱中保
存,。
2.
樣品處理
選取有代表性的蔬菜樣品，
擦掉樣品表面泥土，
剪成
1cm
見方碎片,，
取樣品
1g
,，放入燒杯或提取瓶中，加入
5ml
緩沖溶液,，振蕩
1min
～
2min
,，倒出提取液，
靜置
3min
～
5min
,，待用,。
注意：
樣品不可用水沖洗，
應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣,。
為了保證取樣具有代
表性,，
葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，
果菜從不同個體的表皮處取
樣,。
3.
對照溶液測試
在提取瓶中加入
2.5ml
緩沖溶液,，再加入
100ul
酶液、
100ul
顯色劑,，搖勻
后于
37℃放置
15
分鐘
(
每批樣品的控制時間必須一致
)
,。
15
分鐘后再加入
100
μ
L
底物搖勻
,
此時檢液開始顯色反應(yīng)
,
應(yīng)立即倒入
1cm
比色皿，放入儀器比色池中,，
將儀器調(diào)到測量界面
,
按操作指示面板按鍵區(qū)的
“對照”
按鈕,，
儀器開始做對照。
3
分鐘后儀器自動對照完成,，對照完成后將對照樣取出,，保持儀器界面不變。
注意：對照測試必須在*通道進(jìn)行,，對照測試△
A
應(yīng)＞
0.3
,，若對照測試
的結(jié)果小于以上數(shù)值時，儀器會自動提示“對照錯誤”
,，須重新做對照,，以保證
測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(
對照測試△
A<0.3
的原因：一是酶的活性不夠,，二是反應(yīng)
溫度太低,。
)
4.
樣品溶液測試
另取干凈的提取瓶，放入
2.5ml
樣品提取液,，加入
100ul
酶液,、
100ul
顯色
劑，搖勻后于
37℃放置
15
分鐘
(
放置的時間與對照液放置的時間必須一致
)
,。
15
分鐘后再加入
100
μ
L
底物搖勻
,
此時檢液開始顯色反應(yīng)
,
應(yīng)立即倒入
1cm
比色皿,，
放入儀器比色池中,，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測量”按鈕開始測量，
3
分鐘后
儀器測量完成,，顯示測量結(jié)果,。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當(dāng)蔬菜
樣品提取液對酶的抑制率≥
50%
時,，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類
農(nóng)藥存在,，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)
2
次以上,。
對陽性結(jié)果的樣品,，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
5.
說明
蔥,、蒜,、蘿卜、韭菜,、芹菜,、香菜、茭白,、蘑菇及番茄汁液中,，含有對酶有
影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性,。處理這類樣品時,，可采取整株（體）蔬
菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜,，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法,，減
少色素的干擾。
