色譜常見使用問題的詳細解答
問:用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,,有時發(fā)生快速變化,,原因何在?如何解決?
( 答:關于漂移問題:
1、溫度控制不好,,解決方法是采用恒溫裝置,,保持柱溫恒定
2、流動相發(fā)生變化,,解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā),、反應等
3、柱子未平衡好,,需對柱子進行更長時間的平衡
關于快速變化問題
1,、流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設定流速,,使之保持穩(wěn)定
2,、泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出,。
3,、流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進行適當混合
問:色質聯(lián)用中毛細柱的選擇應注意什么問題?
答:1,、柱效要高
2,、熱穩(wěn)定性好
化學惰性強
具體選擇應注意
1、柱極性,。根據(jù)分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析
2,、柱子內(nèi)徑。內(nèi)徑大小決定柱容量
3,、液膜厚度,。分析樣品溫度一不一樣,對膜厚有不同要求,,溫度高液膜要厚,,溫度低液膜要薄
4、柱長度。柱越長,,柱效越高,分離效果越好,,但也存在吸附問題,,柱子過長,分析時間長,,因此要根據(jù)樣品考慮柱子長度
5,、外涂層(柱體)的選擇
6、另外還有儀器型號,、分析對象等因素
問:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
答:1,、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,,替換篩板或更換柱子,。
2、存在干擾峰,,解決辦法為使用較長的柱子,,改換流動相或更換選擇性好的柱子
( 問:從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩(wěn)定性好壞?
答:1、分配容量(或容量因子)K,,好的柱子在高溫運行后,,分配容量K不應有明顯的下降,否則,,說明柱子的熱穩(wěn)定性不好,。
2、理論塔板數(shù)n,,熱穩(wěn)定性好的柱子經(jīng)受高溫后,,理論塔板數(shù)應基本保持恒定
3、柱子的極性,。熱穩(wěn)定性好的柱子,,高溫前后極性變化不大,具體表現(xiàn)為保留指數(shù)I值沒有大的變化,。
4,、噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后,,噪聲不能增加.
5,、柱子的去活層,毛細管柱子涂固定液前內(nèi)部一般要用去活性試劑去活以增加惰性,。質量好的毛細管柱子高溫后,,去活層
不應該變化,表現(xiàn)在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。