《美國(guó)藥典》中的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法中規(guī)定,，應(yīng)使用國(guó)家參考標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（RSE）,，復(fù)溶后應(yīng)旋渦振蕩不少于20min；復(fù)溶后的原液于冰箱保存不超過14d,，再次使用前要強(qiáng)烈地旋渦振蕩不少于5min,；隨后的每一步稀釋前被稀釋液也要旋渦振蕩不少于1min；不能使用保存的稀釋液,。美國(guó)鱟試劑廠家供應(yīng)的工作標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（CSE）在使用說明書中都對(duì)內(nèi)毒素的復(fù)溶和稀釋有使用旋渦混合器震蕩的要求,。同樣，世界衛(wèi)生組織及各國(guó)藥典中的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法也對(duì)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素的稀釋有震蕩混合的要求,。

為什么對(duì)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素的稀釋有如此特殊的要求呢?這與內(nèi)毒素的化學(xué)成分與結(jié)構(gòu)有關(guān),。

LPS是具有疏水和親水雙重活性的兩性分子；多糖鏈具有親水性,；脂肪鏈具有疏水性,。內(nèi)毒素溶于水或稀釋時(shí)，LPS的親水性糖鏈朝向水和水接觸,，而疏水性的脂質(zhì)鏈部分卻背向水,，這樣,，LPS的疏水端自然聚集成團(tuán)，形成直徑約為0.1μm的雙層殼狀或泡囊,。脂質(zhì)A藏于聚集團(tuán)的內(nèi)部或貼附于器皿上,，而脂質(zhì)A是激活堂試劑的主要部分，在水溶液中,，由于其疏水性而不能與鱟試劑充分接觸,，造成檢測(cè)到的內(nèi)毒素含量偏低。若是檢測(cè)前利用旋渦裝置充分振蕩,，可以使貼附于器皿上的內(nèi)毒素分子脫落,，使聚集團(tuán)的相對(duì)分子質(zhì)量下降。經(jīng)振蕩后的內(nèi)毒素溶液重新靜置一段時(shí)間后,，內(nèi)毒素仍然會(huì)聚集成團(tuán)或貼附于器皿壁上,，所以樣品存放一段時(shí)間后，在使用前仍需充分振蕩,。

實(shí)驗(yàn)表明,，同一批號(hào)的國(guó)家參考標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素在稀釋時(shí)震蕩與否結(jié)果相差很大。若采用旋渦震蕩法稀釋內(nèi)毒素,，效價(jià)測(cè)定的結(jié)果與國(guó)際參考標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（IS）基本一致,；若不經(jīng)振蕩稀釋，則測(cè)定的效價(jià)要比國(guó)際參考標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素低50%～75%,。所以,，內(nèi)毒素在稀釋時(shí)一定要充分振蕩，才能得到所標(biāo)示的效價(jià),。在實(shí)施1995年版的《中國(guó)藥典》前,，我國(guó)相當(dāng)部分的鱟試劑在標(biāo)定靈敏度時(shí)，沒采用振蕩稀釋內(nèi)毒素的方法,，導(dǎo)致標(biāo)定的靈敏度高于實(shí)際值100%~300%,。也就是說，鱟試劑用戶在使用比標(biāo)示靈敏度高1～3倍的堂試劑做細(xì)菌內(nèi)毒素檢查,。