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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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國(guó)內(nèi)人血漿內(nèi)毒素檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)操作方法

時(shí)間:2022/11/30閱讀:986
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一、樣品的前處理
1,、0.5ml人血漿S),,按如下方法稀釋0. 5mlS+0.5mID+1.5mlW2.5mlS5
式中D為專用的稀釋劑W為專用的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)BET用水,;S5為稀釋了5倍的血漿,,下標(biāo)數(shù)字表示稀釋倍數(shù)。
2,、把裝有S5的小瓶置70℃的水浴中10分鐘,。
3把經(jīng)加熱處理的裝有S5的小瓶用3000rpm離心10分鐘,,然后吸取上清液仍記為S5 BET,。
4如果不立即作BET,,可把經(jīng)離心的裝有S5的小瓶置2 ~3℃冰箱保存,,可在3天內(nèi)作BET,。
 


 

二、稀釋標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素
1,、取效價(jià)為10Eu的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素CSE一支,,開(kāi)啟加入0. 1mlW溶解,,然后用封口膜封閉瓶口,。
2把裝CSE安瓿放在旋渦混合器上強(qiáng)烈混合10分鐘得到濃度為10Eu/mlCSE溶液,,記為E10E表示CSE,,下標(biāo)數(shù)字表示濃度
3,、按下步驟制備CSE濃度系列
 


 

以上均需在旋渦混合器混合,。

  • 制備待測(cè)樣品

如下圖所示:
 


 

四、試劑TAL一支,,按標(biāo)示裝量加W復(fù)溶
 
五,、試管設(shè)置與加樣
在電腦的“檢測(cè)"程序上按下述方法設(shè)置反應(yīng)試管并取反應(yīng)試管按下表要求加樣
 



 

六,、檢測(cè)
把加好樣的試管按編號(hào)順序插入檢測(cè)儀器的反應(yīng)孔中反應(yīng),,每支試管在插入反應(yīng)孔前應(yīng)輕輕晃動(dòng)搖勻試管中的內(nèi)容物。
 
,、結(jié)果處理
1,、反應(yīng)的數(shù)據(jù)采集、處理,、結(jié)果表達(dá)等均由檢測(cè)儀自動(dòng)完成,。
2日常的檢測(cè)只需要設(shè)置編號(hào)1,,2,,910,,11,,12號(hào)的反應(yīng)試管利用儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可,。


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