一、家兔檢測法

1923年Seibert提出用家兔檢測熱原方法，1942年美國藥典首先將家兔法作為藥品的熱原檢查,，為保障藥品質(zhì)量和用藥安全發(fā)揮了重要作用,。

目前，對于熱原的概念國內(nèi)外仍未有*統(tǒng)一的認(rèn)識,。但綜合國內(nèi)外文獻(xiàn)報道,，普遍認(rèn)為熱原的本質(zhì)就是細(xì)菌內(nèi)毒素的脂多糖。WHO 文件中同樣提到,，藥品中的熱原就是指細(xì)菌內(nèi)毒素,，至少在藥檢范圍內(nèi)控制內(nèi)毒素就是控制熱原,。嚴(yán)格地講，不是每一種熱原都具有脂多糖( lipoplysaccharide,，LPS)的結(jié)構(gòu),，在藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范條件下，藥品生產(chǎn)的質(zhì)量控制一般可以接受的觀點(diǎn)是:不存在細(xì)菌內(nèi)毒素意味著不存在熱原,。多年來研究表明,，熱原進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng)后，并不直接引起發(fā)熱和其他毒性反應(yīng),，但它可使細(xì)胞釋放內(nèi)源性熱原物質(zhì),。這種內(nèi)源性熱原可直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，刺激體溫中樞,，引起機(jī)體發(fā)熱,。

最早作為熱原檢測法的家兔檢測法也就成為人們檢測內(nèi)毒素的最早方法。此方法即將一定量的被檢標(biāo)本靜脈注入家兔體內(nèi),，觀察其注射后的發(fā)熱情況,，以決定所檢標(biāo)本中有無熱原存在。

家兔檢測法為一種定性檢測內(nèi)毒素的方法,，應(yīng)用歷史較久,。但隨著社會的進(jìn)步、科技的發(fā)展,，制藥工業(yè)飛速前進(jìn),，新藥品種不斷增加，臨床用藥要求越來越高,，家兔法局限性日益突出,。如家兔對內(nèi)毒素在反應(yīng)上有個體差異，敏感度不高,，不能定量檢測內(nèi)毒素等等,，因此家兔檢測法現(xiàn)在已經(jīng)很少使用。

二,、GC/MS檢測方法

氣相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用法是上個世紀(jì)出現(xiàn)的一種內(nèi)毒素檢測方法,。此法主要依據(jù)細(xì)菌內(nèi)毒素的主要毒性部分類脂A水解時產(chǎn)生一種3-羥基脂肪酸的物質(zhì)。這種物質(zhì)是內(nèi)毒素所*的,，并不存在于其他自然界的物質(zhì)當(dāng)中,。每分子的類脂A含有4摩爾的3-羥基脂肪酸，類脂A的平均分子量為8000,。通過對這種特異性3-羥基脂肪酸的檢測,，可以定量檢測內(nèi)毒素的含量。由于儀器的限制，氣質(zhì)聯(lián)用的方法很難成為常規(guī)的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法,。目前只應(yīng)用于科研,，對空氣的質(zhì)量檢測等方面。

三,、鱟試劑檢測方法

我國藥典收載的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法為鱟試驗法,，包括2種方法，即凝膠法和光度測定法,，后者又包括濁度法和顯色基質(zhì)法,。當(dāng)各種檢測法得到的檢測結(jié)果不一致時，以凝膠法的檢測結(jié)果為準(zhǔn),。

鱟試驗法有定性和定量之分,，其按試驗方法還可進(jìn)一步分為凝膠法、動態(tài)濁度法,、終點(diǎn)濁度法,、動態(tài)顯色法和終點(diǎn)顯色法。