高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)檢測(cè)器作為高效液相色譜儀的重要組成部分之一,,它的作用是將流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)定性定量,。
HPLC檢測(cè)器有多種類型,,如何正確選擇檢測(cè)器很重要。由于樣品組分在流通HPLC系統(tǒng)時(shí)會(huì)發(fā)生變化,,因此選擇哪種檢測(cè)器主要取決于樣品及其組成成分的性質(zhì),,或者流動(dòng)相和樣品在通過HPLC系統(tǒng)時(shí)其組成發(fā)生變化的整體性質(zhì)。下面咱們就從幾方面來簡單介紹下常用的幾種高效液相色譜檢測(cè)器,。
HPLC檢測(cè)器功能
不同的HPLC檢測(cè)器需具備的一些共同特征,,包括:
對(duì)混合物中化合物的反應(yīng)是否具有專一性
針對(duì)分析物而非流動(dòng)相的靈敏度和響應(yīng)度
低流通池體積以最大限度地減少分析物譜帶擴(kuò)散
對(duì)分析物濃度的線性響應(yīng)
溫度和流速的變化不應(yīng)影響檢測(cè)器響應(yīng)
常用HPLC檢測(cè)器
質(zhì)譜檢測(cè)器(MS)
分析物首先在離子源中電離,并根據(jù)它們的質(zhì)荷比進(jìn)行分離,。質(zhì)譜檢測(cè)器可以提供高靈敏度及選擇性,。
紫外吸收檢測(cè)器(UV)
紫外吸收檢測(cè)器的類型有固定波長、可變波長和二極管陣列檢測(cè)三種類型,,適用于有較強(qiáng)的紫外光吸收能力的物質(zhì)檢測(cè),。
光電二極管陣列檢測(cè)器(PDA)
可以同時(shí)測(cè)量多個(gè)波長吸光度的可變波長型UV/Vis檢測(cè)器。其主要優(yōu)勢(shì)是可以檢測(cè)每種分析物吸光度最大的波長(λ max),,從而最大限度提高每種分析物的靈敏度,。
熒光檢測(cè)器(FLD)
熒光檢測(cè)器是靈敏度和特異性很高的檢測(cè)器,它包括單波長,、多波長和激光感應(yīng)檢測(cè)器,。FLD檢測(cè)器適用于本身自帶熒光基團(tuán)或衍生化后能產(chǎn)生熒光的化合物。
其他特殊HPLC檢測(cè)器
電導(dǎo)檢測(cè)器(ELCD)
ELCD的工作原理是使用由流通池組成的傳感器測(cè)量流動(dòng)相電導(dǎo)率,,流通池包含由鉑,、鋼或貴金屬制成的兩個(gè)電極。
示差折光檢測(cè)器(RID)
RID依賴于由于洗脫物的存在而產(chǎn)生的流動(dòng)相折射率的變化,,它的靈敏度低,,但仍被認(rèn)為是通用型檢測(cè)器。
電化學(xué)檢測(cè)器(ECD)
ECD包括平衡和動(dòng)態(tài)檢測(cè)器,,它們對(duì)流動(dòng)相的組成或流速的變化敏感,,用于檢測(cè)一些具有氧化還原性質(zhì)的化合物,。
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)
ELSD有兩種類型,包括低角度光散射和多角度光散射檢測(cè)器,。它可以測(cè)量散射光,,是在洗脫液通過傳感器單元時(shí)基于分子大小檢測(cè)高分子量分子的理想方法。
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