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單克隆抗體（mAb）能夠有效治療癌癥,、自身免疫疾病、病毒感染及其他疾病,?？贵w治療藥物的新發(fā)展旨在增加更多的特異性結(jié)合域（雙特異性和多特異性），提高其有效性,，和（或）將分子縮小為特異性結(jié)合域（如 scFv 或 Fab 片段）,，實(shí)現(xiàn)更好的組織滲透性,。隨著分子變得愈加復(fù)雜,，潛在的高／低分子量（H/LMW）雜質(zhì)也變得愈加復(fù)雜。因此，為了準(zhǔn)確分析各種分子,，需要比 UV 更加先進(jìn)的檢測(cè)方法來(lái)表征 mAb 樣品,。

多角度光散射法（MALS）適用于測(cè)定樣品組分的分子量，更好地了解分子的聚集體和片段,。MALS檢測(cè)的是分子被激光束擊中時(shí)的散射光,。散射光的強(qiáng)度取決于分子的濃度和分子量。本文中,，我們使用了TSKgel® UP-SW3000-LS 色譜柱和 LenS3 MALS檢測(cè)器針對(duì) mAb 標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分析,。據(jù)此，我們展示了增加 MALS檢測(cè)器可以獲取哪些數(shù)據(jù),、方法的穩(wěn)健性如何,、以及便于集成MALS 檢測(cè)進(jìn)入 mAb 分析流程中的設(shè)備。

實(shí)驗(yàn)條件：

為了展示 MALS 檢測(cè)與尺寸排阻色譜法聯(lián)用分析單克隆抗體的優(yōu)勢(shì),，我們采用了如下所述的mAb對(duì)照品和一種通用的分離方法,。因?yàn)楣馍⑸鋵?duì)鹽晶體、微生物或色譜柱脫落物等顆粒比 UV檢測(cè)更加敏感,，為了獲得高質(zhì)量的 MALS 數(shù)據(jù),，采取了以下匹配措施：流動(dòng)相兩次過(guò)濾；使用光散射專(zhuān)用 UHPLC 色譜柱（TSKgel UP-SW3000-LS）,，該柱曾與其他兩種色譜柱進(jìn)行比較,，其噪音水平低；選擇 LenS3 MALS 檢測(cè)器,，其具有較高的靈敏度可以表征低豐度的雜質(zhì),。

• Tosoh多角度激光光散射檢測(cè)器LenS3

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• UHPLC尺寸排阻色譜柱TSKgelUP-SW3000-LS

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