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利用血管緊張素I的提取比較傳統(tǒng)SPE柱與磁性萃取劑的性能

關(guān)鍵詞

血管緊張素I,，液相色譜質(zhì)譜,，固相萃取,，Angiotensin I,，Ang I，Renin,，LC-MS/MS,，SPE

前言

血管緊張素I（Ang I）是較為常見的臨檢標(biāo)志物之一，通過對血管緊張素I提取效果的測試,，能夠有效地評價各種樣品前處理手段的臨床適用性和技術(shù)性能,。

本文通過對比市售的某有名的進(jìn)口品牌HLB 96位SPE多孔板和HLB磁性SPE萃取劑提取Ang I試驗的各項方法學(xué)指標(biāo),，直觀地比較了兩者的性能表現(xiàn)。也為臨床SPE樣品前處理技術(shù)的發(fā)展前景提供了非常有價值的參考,。

實(shí)驗設(shè)計

如下表所示,，使用1% BSA制備四個濃度水平的Ang I系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，輔以穩(wěn)定同位素標(biāo)記的Ang I內(nèi)標(biāo),。

設(shè)定如下條件的SPE,，應(yīng)用于某著名進(jìn)口品牌HLB 96位SPE多孔板。使用適配的正壓96孔SPE操作裝置運(yùn)行樣品,。

與此對應(yīng)的，為AUTO M32全自動萃取儀設(shè)定如下的程序運(yùn)行樣品,，每個樣品使用2mg HLB磁性萃取劑,。

數(shù)據(jù)和比較

將實(shí)驗設(shè)計中所述的四個標(biāo)準(zhǔn)樣本，每個樣品重復(fù)三次提取,，比較兩種前處理方法提取后,，在LC-MS/MS上測得的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果如下圖所示,。其中,，左側(cè)藍(lán)色柱為使用某著名進(jìn)口品牌HLB 96位SPE多孔板提取后的測定結(jié)果，右側(cè)橙色柱為使用磁性萃取劑提取后的測定結(jié)果,。

可以看到,，兩種前處理方法無論在外表峰面積,、內(nèi)標(biāo)峰面積、計算濃度上的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均沒有顯著的差別,，但是磁性萃取劑的結(jié)果在大多數(shù)水平下都略好于傳統(tǒng)的96位SPE多孔板,。

在提取率的比較中，我們選擇某著名進(jìn)口品牌HLB 96位SPE多孔板提取后測得的峰面積為基準(zhǔn)（100%）,，以磁性萃取劑提取后測得的峰面積與之比較,。如下圖所示，左側(cè)藍(lán)色柱為使用某著名進(jìn)口品牌HLB 96位SPE多孔板提取后的測定結(jié)果,，右側(cè)橙色柱為使用磁性萃取劑提取后的測定結(jié)果,。

最后如下圖展示的LOQ水平兩種方法提取后，在LC-MS/MS所得的MRM色譜圖,。圖a為使用傳統(tǒng)的96位SPE多孔板所得色譜圖,，圖b為磁性萃取劑所得色譜圖,。可以看到,，在所有濃度水平下,，磁性萃取劑提取測得峰面積均顯著地好于傳統(tǒng)的96位SPE多孔板，且均超過后者50%以上,，最高甚至達(dá)到了約1.8倍,。

結(jié)果討論
明顯地，在LOQ水平下,，磁性萃取劑提取得到的色譜峰高超過了傳統(tǒng)的96位SPE多孔板提取,，這與提取率結(jié)果是*一致的。

通過上述數(shù)據(jù)比較,，我們可以得到如下表所述的結(jié)果,。
 

均優(yōu)于某著名進(jìn)口品牌的HLB 96位SPE多孔板,。同時，AUTO M32全自動提取儀固有的“一次移液”和“無人值守”操作模式，降低了樣品前處理中的人為參與,，同時大幅提高了自動化水平。

• AutoM32磁性固相萃取儀

  前處理設(shè)備在線詢價