豬乳腺上皮細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥5000.00 |
- 公司名稱 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間2025/4/9 10:53:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 381
| 5×10^5 | 5000.00元 | 15 瓶可售 |
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X2277 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 乳房組織 | 種屬來(lái)源 | 豬 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣,，多角形細(xì)胞 |
一,、細(xì)胞基本屬性：
細(xì)胞名稱 | 豬乳腺上皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X2277 |
組織來(lái)源 | 乳房組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
種屬來(lái)源 | 豬 | 傳代特性 | 根據(jù)細(xì)胞特性 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣，多角形細(xì)胞 |
包被條件：
培養(yǎng)基：原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率：每2-3天換液一次
傳代比例：
消化液：0.25%胰蛋bai酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介 |
乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,。淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚,，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中,。乳房腺體由15-20個(gè)腺葉組成，每一腺葉分成若干個(gè)腺小葉,，每一腺小葉又由10-100個(gè)腺泡組成,，這些腺泡緊密地排列在小乳管周圍,，腺泡的開(kāi)口與小乳管相連。 乳腺上皮細(xì)胞來(lái)源于乳腺小葉中,。它們與腺體導(dǎo)管和脂肪組織一起在乳腺中形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),。乳腺上皮細(xì)胞在人和動(dòng)物體出生、發(fā)育和妊娠中均會(huì)受荷爾蒙調(diào)控而進(jìn)行一系列的增長(zhǎng),、遷移和分化,。激素水平失調(diào)、細(xì)胞外基質(zhì)的變化和其它的基因因素都會(huì)導(dǎo)致乳腺上皮細(xì)胞惡性增長(zhǎng),，終導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生,。了解乳腺上皮細(xì)胞的特性可以幫助我們理解乳腺癌的病例機(jī)制以及為治療確定新的靶點(diǎn) |
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠,，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min,。
二、在超凈工作臺(tái)中,，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦,。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,，保留大腦皮質(zhì)。
五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中,，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶,，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI),，混勻后37℃水浴消化1-1.5h,。
六、室溫1 000×g離心8min,，去上清液,。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮,，充分混勻,，1 000×g,，20min，4℃離心,，去上清,。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶,，0.05-0.1％I型膠原酶,，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻,，37℃水浴消化0.5-1h,，700×g室溫離心6min，去上清液,。
九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g,，60min,，4℃)，1000×g,，4℃離心10min,。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,，吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,，6min，室溫),，去上清液,。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,，隨后隔天換液,。
原代細(xì)胞使用方法：
是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣,，多角形細(xì)胞,，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代,；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；
4)待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；
3)經(jīng)1000rpm,，離心5min，丟棄上清,，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱),。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人胰腺癌氟耐藥株
人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株
人卵巢癌耐藥株
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長(zhǎng)春新堿耐藥株
人宮頸癌多藥耐藥細(xì)胞
人卵巢癌多藥耐藥細(xì)胞
曲妥珠（赫塞?。┠退幍娜巳橄侔┘?xì)胞
人肺癌細(xì)胞/5Fu耐藥株
人卵巢癌細(xì)胞CoC1耐藥亞株
乳腺癌耐藥細(xì)胞
人膽管癌耐藥細(xì)胞株
人乳腺癌表柔比星耐藥細(xì)胞株
人白血病HL-60細(xì)胞耐藥細(xì)胞株
胃癌耐藥細(xì)胞株
原代細(xì)胞
傳染性膿皰皮炎病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
短古柏線蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
節(jié)狀古柏線蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
點(diǎn)狀古柏線蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
古柏線蟲通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
茹拉巴德古柏線蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
牛棒桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
偽結(jié)核棒桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
牛腎盂腎炎棒桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
棒桿菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
豬乳腺上皮細(xì)胞潰瘍棒桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
反芻獸考德里氏體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
刺激隱核蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
新生隱球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
貝氏隱孢子蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
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