總?cè)饧谞钕僭彼釞z測試劑盒（定量）用于人血清和血漿中總T3的體外定量檢測

【前言簡介】

科潤達(dá)生物代理的這款試劑盒是進(jìn)口試劑盒，用于檢測樣本中的總?cè)饧谞钕僭彼幔?/span>T3）,，血清三碘甲狀腺原氨酸濃度的測定通常被認(rèn)為是診斷甲狀腺功能異常的有價值工具,。這一重要性為過去20年發(fā)生的分析方法學(xué)的重大改進(jìn)提供了動力。單一特異性抗血清的出現(xiàn)和阻斷劑對T3結(jié)合血清蛋白的發(fā)現(xiàn),，使得發(fā)展簡單的放射免疫分析成為可能,。

【檢測原理】

總?cè)饧谞钕僭彼幔?/span>T3）ELISA試劑盒是基于競爭結(jié)合原理的固相酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。

微量滴定板上包被有多克隆山羊抗小鼠抗體,。標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和患者血清與含有抗T3的單克隆抗體的分析試劑一起孵育。在后續(xù)的孵育過程中,，患者樣品的內(nèi)源性T3與T3辣根過氧化物酶綴合物競爭有限數(shù)量的固相結(jié)合位點,。孵育后,，將未結(jié)合的共軛物洗掉。

結(jié)合過氧化物酶結(jié)合物的量與樣品中T3的濃度成反比,。添加底物溶液后,，顯色強度與患者樣品中T3的濃度成反比。

【檢測方法】

試劑準(zhǔn)備

洗滌液：洗滌液加入蒸餾水,，制成洗滌液，充分混勻,。

檢測步驟

總?cè)饧谞钕僭彼釞z測試劑盒（定量）檢測前,，所有試劑和樣本需在室溫平衡30min，試劑混勻并避免起泡,。一旦實驗開始,，所有步驟不能被打斷。注意更換槍頭,，避免污染,。孵育步驟嚴(yán)格按照時間和溫度進(jìn)行。

1） 取所需數(shù)目的板條,。

2） 將標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品分別50μl加入到相應(yīng)的微孔中，注意更換槍頭,。

3） 每孔加入50ul分析試劑,，混勻10秒鐘，這步驟很重要,。

4） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘,。

5） 在每一微孔中加入50μl酶聯(lián)物，輕輕振板混勻10秒鐘,，混勻步驟很重要,。

6） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

7） 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,，每孔用300μl稀釋好的洗滌液洗板5次,。最后在吸水紙上拍干除去殘余液體。清洗過程的正確與否對測定結(jié)果的靈敏度和精密度有很大影響,。

8） 在每一微孔中加入100μl TMB底物液,。

9） 室溫（18-25℃）溫育10分鐘。

10） 在每一微孔中加入100μl 終止液以終止底物反應(yīng),。

11） 加終止液后10分鐘內(nèi)450nm處讀取OD值,。

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