LuminMax（冷光儀,又稱:化學(xué)發(fā)光光度計(jì),、化合光以及生物發(fā)光檢測(cè)儀、化學(xué)發(fā)光儀,、BL/CL分析儀）技術(shù)簡(jiǎn)介 引 言生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光是自然界中一種常見(jiàn)現(xiàn)象,。發(fā)光主要物質(zhì)是由酵素（如：蟲(chóng)熒光素酶）、受質(zhì)（如：熒光素）及其輔助ATP等所組成,。如未涉及細(xì)胞,，ATP是不需要的。所以二種重要的化學(xué)物質(zhì)是酵素和受質(zhì)：若將這二者放在一起就會(huì)產(chǎn)生化學(xué)冷光,。光強(qiáng)度與酵素濃度成線形關(guān)系,，所以檢測(cè)光度就可定量濃度?；瘜W(xué)發(fā)光指化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中發(fā)射出來(lái)的光,，又稱冷光；生物發(fā)光是化學(xué)發(fā)光的一種,，專指由酶催化的化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中發(fā)射出的光?；瘜W(xué)和生物發(fā)光經(jīng)常被用于測(cè)定樣品中未知成分的量,，并且在過(guò)去的十年里在基因表達(dá)和基因調(diào)控的研究中發(fā)揮著非常重要的作用。 通過(guò)發(fā)射光的比率可以推出未知成分的濃度，因此測(cè)定化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中的發(fā)射光是非常有用的,。反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的光與發(fā)射光的量產(chǎn)率是直接相關(guān)的,，相應(yīng)的，與發(fā)光物質(zhì)的濃度成比例,。因此,，反應(yīng)過(guò)程中的光可以相對(duì)反映出目標(biāo)樣品中發(fā)光物質(zhì)的量。近年來(lái),，生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光的研究及使用與日俱增,。從測(cè)試細(xì)胞活性的ATP-熒光素酶檢驗(yàn)，到當(dāng)今的DNA,、基因及蛋白質(zhì)分析的應(yīng)用日益擴(kuò)大,。與熒光發(fā)光不同，它不需要外部光源,。冷光是從化學(xué)反應(yīng)所產(chǎn)生的,。利用光子計(jì)數(shù)檢測(cè)器，通過(guò)對(duì)反應(yīng)中所產(chǎn)生的光子計(jì)數(shù),，冷光檢驗(yàn)已成為zui靈敏的光學(xué)檢測(cè)方法之一,。美國(guó)Maxwell Sensors公司的LuminMax-C研究級(jí)化學(xué)發(fā)光儀（冷光儀）為廣大用戶提供了一款具有超高靈敏度和重復(fù)精度、易使用,、結(jié)構(gòu)緊湊及經(jīng)濟(jì)實(shí)用的儀器,。該儀器可測(cè)量96孔微孔板（黑或白）中的發(fā)光強(qiáng)度。微孔板底部很清潔,，因此,，從孔的底部產(chǎn)生的發(fā)光即可被檢測(cè)。（詳細(xì)技術(shù)規(guī)格請(qǐng)登錄：www.tansi.com.cn） 優(yōu) 點(diǎn) • 化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)法相對(duì)于其它分析技術(shù)有許多優(yōu)點(diǎn)：非常靈敏,；動(dòng)力學(xué)范圍廣,；儀器設(shè)備便宜；這一新的發(fā)光實(shí)驗(yàn)方法的出現(xiàn)使得這一技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛,。LuminMax-C使用了超級(jí)光電倍增管作為檢測(cè)器,，它具有*的靈敏度。檢測(cè)靈敏度可達(dá)10-18 摩爾（HRP）以上,。它具有檢測(cè)從反應(yīng)中產(chǎn)生光子數(shù)的能力,，這意味著它可以檢測(cè)樣品中被分析物極小的份量（濃度）。 • 優(yōu)秀的靈敏度和低背景使發(fā)光檢測(cè)儀從其它分析方法中脫穎而出,。發(fā)光檢測(cè)儀比吸收光譜儀靈敏 100,000 倍,，比熒光儀至少靈敏 1,000 倍。 • 在發(fā)光反應(yīng)中,，有兩種成分的光能夠到達(dá)檢測(cè)儀,。*種與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中的有限的反應(yīng)物的濃度成比例,。第二種也就是背景光，是基本不變的,，與反應(yīng)物中的塑料,、雜質(zhì)發(fā)出的磷光等有關(guān)。相對(duì)于分光光度計(jì)和熒光儀等其它檢測(cè)技術(shù),，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀的背景光非常低,。 • 廣泛的動(dòng)力學(xué)范圍和低儀器成本也是化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀的優(yōu)勢(shì)。不需稀釋樣品或?qū)悠芳?xì)胞進(jìn)行修飾,，測(cè)量范圍可以達(dá)到7個(gè)數(shù)量級(jí)以上的濃度,。 • 使用簡(jiǎn)單方便：具有用戶友好界面的軟件在隨機(jī)奉送的光盤(pán)里，它非常容易安裝,。LuminMax-C不但體積小巧,，而且通過(guò)簡(jiǎn)單的插入式連接（USB或者串口）與計(jì)算機(jī)相連，便于攜帶,。當(dāng)按下“GO”鍵,，系統(tǒng)自動(dòng)并快速地掃描所有選中的微孔，并且顯示結(jié)果,。計(jì)算結(jié)果以電子表格的形式顯示,。數(shù)據(jù)以光子數(shù)或相對(duì)光單元（RUL）作為報(bào)告被顯示。 用 途化學(xué)發(fā)光儀經(jīng)常被用于： ·ATP（三磷酸腺甙）檢驗(yàn),、熒光素酶檢驗(yàn) ·免疫及proteomics ·核酸,，DNA及基因組 ·病毒研究（比如：SARS、禽流感病毒研究） ·臨床診斷研究 ·染色體分析 ·毒性試驗(yàn) ·細(xì)胞活力試驗(yàn) ·餐館衛(wèi)生檢測(cè) ·環(huán)境檢測(cè) ·工業(yè),、農(nóng)林業(yè),、畜牧業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)等其它用途zui廣泛的用途是對(duì)利用報(bào)告基因檢測(cè)目標(biāo)基因的表達(dá)以及檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) ATP 水平,。 1. 報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)：分子生物學(xué)家和細(xì)胞生物學(xué)家利用報(bào)告基因研究基因的表達(dá)和調(diào)控,。將報(bào)告基因引入細(xì)胞 DNA 使之與某一特定分子事件相關(guān)，可以為這一分子事件帶來(lái)可測(cè)性,。通常檢測(cè)的分子事件是基因功能,，具有可測(cè)性的是發(fā)光。目前,，市場(chǎng)上有許多發(fā)光報(bào)告基因出售,。包括：螢火蟲(chóng)熒光素酶（ firefly luciferase ），β－半乳糖苷酶（ B -galactosidase ）,，β－葡萄糖苷酸酶（B -glucuronidase ,， GUS ），堿性磷酸酶（ alkaline phosphatase ）,，和人生長(zhǎng)激素（ human growth hormone ,， hGH ）,。 高靈敏度，低成本,，快速以及使用簡(jiǎn)單使得發(fā)光檢測(cè)儀成為理想的基因表達(dá)研究工具。 2. ATP 水平測(cè)定：所有活細(xì)胞都含有 ATP ,。 ATP 可以從細(xì)胞中提取出來(lái),，用螢火蟲(chóng)熒光素酶檢測(cè)。在這個(gè)發(fā)光反應(yīng)中,，ATP 是限制性反應(yīng)物,。因此，到達(dá)發(fā)光檢測(cè)儀光電倍增管的光與樣品中 ATP 的含量成比例,，相應(yīng)的與提取 ATP 所用的細(xì)胞數(shù)成比例,。ATP發(fā)光檢測(cè)方法已經(jīng)使用了幾十年。ATP的測(cè)量被應(yīng)用于： • 水,，食物,，藥品，化妝品中的微生物污染檢測(cè)：ATP的發(fā)光檢測(cè)方法可以檢測(cè)樣品中的所有微生物,，因而被用于檢測(cè)水中的大腸桿菌含量,，包括飲用水和用于oil field injection ， cooling system 以及紙加工過(guò)程的工業(yè)用水,。ATP的發(fā)光檢測(cè)方法還可以用于藥品,，化妝品，牛奶以及其它食品的微生物控制,。 • 生物數(shù)量評(píng)估： 微生物學(xué)家通過(guò)檢測(cè) ATP 的含量測(cè)定土壤和沉積物中的全部活生物含量,。相關(guān)研究還包括污染物對(duì)淡水和海水微生物的影響。 • 臨床研究： 臨床研究應(yīng)用包括：評(píng)價(jià)抗生素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響,，了解不同藥物對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的影響等,。 技術(shù)說(shuō)明盤(pán)形式: 微光度測(cè)定盤(pán)(96 well) 光輻射探測(cè): 生物或化合光 靈敏度: 光電計(jì)數(shù)器，１attomole HRP（10-18 摩爾HRP）波長(zhǎng):300-680nm 操作: 自動(dòng)掃描所有的wells 可調(diào)節(jié)integration時(shí)間 (0.01-10.0 秒) 可調(diào)節(jié)掃描次數(shù)接線: 顯示所有的microwell數(shù)據(jù) 容易校準(zhǔn)數(shù)據(jù)輸出: Excel格式 連接PC的以太網(wǎng)接口軟件: 用戶易使用的軟件尺寸: 30.5 X 28 X 14 (+2.5) CM 應(yīng)用場(chǎng)所： · 高等院校生命科學(xué)及生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室,；生物化學(xué)技術(shù)研究院所實(shí)驗(yàn)室 · 醫(yī)院研究實(shí)驗(yàn)室,；生物制藥實(shí)驗(yàn)室 · 政府藥檢、商檢,、疾控中心實(shí)驗(yàn)室 · 環(huán)境試驗(yàn)室,；法醫(yī)試驗(yàn)室 · 食品等工業(yè)質(zhì)量控制和檢測(cè)試驗(yàn)室