NanoDrop 2000 超微量分光光度計 NanoDrop 2000 超微量分光光度計 ND 2000
- 公司名稱 蘇州亞凡生物技術有限公司
- 品牌
- 型號 NanoDrop 2000 超微量分光光度計
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2017/7/15 9:10:02
- 訪問次數(shù) 4458
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一,、產(chǎn)品應用
ND-2000是目前國內(nèi)外實驗室中使用的一款微量分光光度計,,其*的性能,、準確的結(jié)果贏得了廣大用戶的好評。
該產(chǎn)品可用于以下幾個方面:
* 紫外檢測:常規(guī)紫外光波長下檢測樣品吸光值,;
* 核酸檢測:可檢測dsDNA,、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm,、280nm處的吸光值,;
* 探針檢測:檢測熒光標記探針的吸光值,,可用于去除未能標記探針的樣品;
* 細胞培養(yǎng)物檢測:檢測細胞培養(yǎng)物在600nm處的吸光值,;
* 蛋白檢測:檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值,;
* 蛋白標記檢測:可檢測被BCA、Bradford或Lowry標定的蛋白樣品,,自動畫出標準曲線并計算出待測蛋白質(zhì)濃度,。
二、 產(chǎn)品簡介
NanoDrop 2000超微量分光光度計是NanoDrop的產(chǎn)品,,應用液體的表面張力特性,,樣品體積只需要 0.5~2ul,,在檢測臺上,,經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達到快速、微量,、高濃度,、免石英管、免毛細管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點,。此產(chǎn)品設計受保護,并在*廣受歡迎,,其準確度與便利性讓科學家得以更有效率進行各項研究,。
NanoDrop 2000使用高能量氙燈(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光譜檢測,,且不需要暖機,開機后立即使用,。搭配高感度CCD array檢測器,檢測吸收值可高達300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),,大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測,。
待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的zui高要求,一般核酸,、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻為*,,若無vortex mixer也應以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔心genomic DNA可能因前述動作而斷裂,,則改以55?C加熱約一分鐘,,使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài),,以確保 2ul 具有代表性。
檢測時選擇不同檢測模式,,可以得到zui快速的結(jié)果:
● Nucleic Acid – 吸收光譜,、230nm, 260nm, 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio,、260/230 ratio及核酸濃度,。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜(以1mm光徑吸收值呈現(xiàn))。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值),、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度,。僅適用于純化后的蛋白質(zhì),須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)(mass extinction coefficient)方可計算,。
● BCA,、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果,自動畫出標準曲線并計算R square,,待測蛋白質(zhì)濃度,。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑,,因呈色劑隨時間會逐漸加深,,使用前請詳閱試劑說明書并制備不同濃度的標準品,在*時間內(nèi)完成檢測,,以得到良好的標準曲線,。每個標準曲線zui多可有七個標準品,每個標準品zui多可做五重復,。
* 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用 2ul,,每個樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙(編號: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留,。觀看影片,。
濃度范圍:
樣品種類 | zui低濃度 | zui高濃度 (超過時請稀釋樣品) | 再現(xiàn)性 (五重復以上) |
核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul (dsDNA) 12000 ng/ul (RNA) | 濃度范圍在 2-100 ng/ul 時,SD為 ± 2 ng/ul 濃度范圍大于 100 ng/ul 時,,CV為 ± 2% |
純BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 濃度范圍在 0.05-10 mg/ml 時,,SD為 ± 0.10 mg/ml 濃度大于 10 mg/ml 時,CV為 ± 2% |
蛋白質(zhì),,以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV:± 2% (在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然) |
蛋白質(zhì),以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV:± 2% (在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然) |
蛋白質(zhì),,以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 濃度范圍在 100-500 ug/ml 時,,SD為 ± 25 ug/ml 濃度大于 500 ug/ml 時,,CV為 ± 5% |
蛋白質(zhì),,以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 濃度范圍在 15-50 ug/ml 時,,SD為 ± 4 ug/ml 濃度大于 50 ug/ml 時,CV為 ± 5% |
三,、技術參數(shù):
1,、波長范圍: 190-840nm;
2,、波長精度: 1nm,;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm),;
4,、其它:
5,、檢測下限:2ng/μl(dsDNA),;
6、檢測上限:15000ng/μl(dsDNA),;
7,、吸光率精確度:0.002 absorbance (
8,、吸光率準確性:2%(at 0.76 at 257 nm),;
9、吸光率范圍:0.02-300 (相當于
10,、核酸檢測周期:< 5s;
11,、體積:
四、使用方法舉例:
dsDNA:在主畫面點選Nucleic Acid,,計算機與儀器自動完成聯(lián)機,。依照DNA所溶于之液體準備該溶液(務必確認DNA溶于二次水、TE buffer或哪一組kit的elution buffer)取出1.5 ul 點在偵測臺上,,放下上臂后再按Blank,。在右上方拉選Sample Type 選 DNA-50,在Sample ID位置輸入樣品名稱,,將樣品混勻,,取出1.5 ul 點在偵測臺上,放下上臂后再按Measure,。
五,、結(jié)果整理:
NanoDrop2000 軟件在偵測一開始會詢問檔案欲存至何處,若未,則檔案會存在上一個使用者的檔案內(nèi),。
六,、注意事項:
1. 偵測后立即使用拭鏡紙(Kimwipe類)擦拭臺面。先取一張將上下臺面的液體吸走,,再將此laboratory wipe吸過樣品的面反折到內(nèi)部,,折迭四次后以單方向多次擦拭臺面(DNA 擦 5次,Protein 擦 20次),。
2. 同一滴液體只能做一次偵測,,欲重復定量同一樣品,請擦掉前一滴,,重新取出一滴進行偵測,。
3. 基本上核酸樣品可使用1~2ul做測量,隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求,,原則上不超過 2ul,。并請使用2ul pipette避免體積不足導致液柱無法完整形成。唯蛋白質(zhì)樣品因呈色劑與蛋白質(zhì)本身特性,,務必使用2ul進行偵測,。
4. 當軟件跳出錯誤訊息時,請詳細閱讀并依指示進行障礙排除,。zui常發(fā)生的情形是在偵測過程液柱并未正確形成,,軟件會出現(xiàn)以下訊息??上扔萌庋塾^察液柱是否未完整連接上下臺面,,或樣品內(nèi)有泡泡,將上臂拉起后,,擦掉該滴樣品,,再重新進行偵測,必要時可將樣品體積加大至2ul,。
5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之腐蝕樣品,,其它無腐蝕性之液體皆可使用。
七,、日常與定期維護:
* 平時保持臺面及儀器本身清潔,。
* 定期校正。
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